3. 使用钙离子载体A23187

钙离子载体 A23187(ionophore A23187)能直接诱发 Ca2+ 进入精子细胞内,提高细胞内的ca2+ 浓度,从而导致精子的获能。因此,A23187被广泛用于精子的获能处理。值得注意的是,要控制A23187的工作浓度和作用时间,否则会导致精子的活力下降和死亡。

4. 使用肝素

肝素是一种高度硫酸化的氨基酸多糖类化合物,当它与精子结合后,能引起 Ca2+ 进入精子细胞内部而导致精子的获能(First and Parrish,1988)。 研究发现,对体外受精结果起关键作用的是受精液中的肝素浓度。因此,现省去了肝素预先获能处理这一步,直接将肝素(50mg/L)添加到受精液中进行受精。

总之,精子的获能是诸多因素综合作用的结果,任何导致精子质膜稳定性下降和 Ca2+ 内的操作均有可能引起精子的获能,上述获能处理方法只不过在一定程度上起到精子获能的主导作用。如精子的冷冻保存,将可能去掉精子的被膜蛋白,使精子质膜的稳定性下降,制冷冻保存的精子容易获能,其体外受精的效果亦较好,且不经任何获能处理亦能受精卵母细胞。当在受精液中添加一定浓度的肝素时,则能进一步提高精子的体外受精效果。