3. 胚胎干细胞作为核供体
ES 细胞是早期胚胎细胞或囊胚内细胞团细胞经抑制分化后培养而筛选出来的一类全能细胞,这种细胞具有正常的二倍体核型,它既可以在特定条件下进行无限增殖而不发生分,又可以在特定条件下分化为包括生殖系在内的各种细胞和组织(Evans and kaufman,1981)。迄今,在小鼠和人已培养建立胚胎干细胞系。此外,将 PGCs从胎儿的原生殖脊分离 来进行培养,也可以形成在功能和形态上与 ES 细胞相同的细胞系。ES 细胞具有体外发育全能性,并且可以在体外无限传代,因此它是动物克隆的理想供体细胞。ES细胞作为核移供体细胞与体细胞的制备方法类似,亦需进行细胞周期的调控。
供体细胞一般均为活的细胞。但最近Loi等(2002)的研究发现,绵羊物理变性的体细胞 移植到受体卵母细胞后,亦能重新激活发育到囊胚阶段,并获得克隆绵羊。由此表明,体细克隆的必要成分是供体细胞的细胞核DNA,而非染色体蛋白和功能性的中心粒。这一研究结果提示,供体细胞可以通过冻干保存,使得供体细胞的保存运输更为简单方便。