1  屏障环境笼器具清洁灭菌效果监测

1.1 采样面积：被采表面﹤100cm² 取全部表面。被采表面﹥100cm²，取100 cm²。

1.2 采样方法：用 5 cm×5 cm灭菌规格板放在检测笼器具表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米计算。

1.3 检测方法：把采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0mL接种平皿将冷却至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃恒温箱培养48h,计算菌落数。

1.4 结果计算：

                                                                    平均每皿菌落数×采样液稀释倍数  

物体表面菌落总数（CFU/cm²）=       ------------------------------------------------                                

                                                                        采样面积（cm²）

1.5  结果判定：物体表面菌落总数（CFU/cm²）≦5

2  普通环境笼器具清洁灭菌效果监测

 2.1 采样方法：普通环境笼器具经消毒剂消毒1～2h后，用浸有无菌生理盐水的棉拭子，在被检物体表面涂拭采样，剪去手接触棉签棒部分，将棉拭子放入装 10mL 无菌生理盐水稀释液中试验时震荡混匀，无菌吸取 1:10 样品均匀液 1mL 缓慢注入盛有 9mL 稀释液的试管中，制成 1:100 的样品匀液，按此方法制成 10 倍系列的样品匀液。

2.2  检测方法： 根据样品污染的估计，选择 1-3 个适宜的样品稀释液各吸取 1mL 于无菌平板内，每个稀释度做两个平板。同时吸取空白液（生理盐水）1mL 加入两个平板内做空白对照。然后注入约 15mL—20mL 冷却至 45℃左右的营养琼脂于平板内，并转动混匀待凝固后置 36℃±1℃恒温培养箱中培养 24—48h。

2.3 结果计算：

                                                                 平均每皿菌落数×采样液稀释倍数  

物体表面菌落总数（CFU/cm²）=     ---------------------------------------------                                  

                                                                   采样面积（cm²）

2.4 结果判定：物体表面菌落总数（CFU/cm²）≦10