1 剖解时骨髓采集法
1.1在犬剖解时,取出股骨,将其断面的骨髓挤在有稀释液的试管内或玻片上,继而涂片、染色、镜检。
2 骨髓穿刺方法
2.1 穿刺点定位
2.1.1 胸骨:穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3处。
2.1.2 胫骨:穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1厘米处。
2.1.3 肋骨:穿刺部位在第5~7肋骨各自的中点上。
2.1.4 股骨:穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。
2.2 采集前的准备
2.2.1 麻醉用物品的准备:50 ml烧杯1个,3%戊巴比妥钠溶液、一次性注射器、一次性静脉针
2.2.2 消毒物品的准备:碘伏棉球、75%酒精棉球
2.2.3 操作用物品的准备:无菌敷料若干、灭菌镊子2把、无菌乳胶手套1副、穿刺针1支、粗剪刀1把、剃刀1把、小烧杯1个、犬解剖台1张
2.3 动物的麻醉
静脉注射3%戊巴比妥钠溶液(见SOP-TOX-022),1ml/kg。
2.4 备皮
将犬侧卧位放于犬解剖台上,用粗剪刀将犬一侧髂骨上棘周围约直径10cm范围内毛剪去, 将剪下的毛放入已加少许水的小烧杯中,然后用剃刀把剩下的毛刮净。
2.5消毒
以碘伏棉球以髂骨上棘后大约2cm处的嵴部为中心由中间向四周依次消毒周围皮肤2次, 注意不要留空隙,再用75%酒精棉球将碘伏脱去。
2.6 穿刺
操作者带无菌手套,确定穿刺点(髂骨上棘后大约2cm处的嵴部),估计从皮肤到骨髓腔的距离并依此固定骨髓穿刺针的长度。用左手拇、食指把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入皮肤及软组织全层直至髂骨骨面,这时可感到阻力明显增强。将穿刺针保持与骨面方向垂直固定,小弧度左右旋转穿刺针将其钻入骨质。当感到落空感时表示穿刺针已进入骨髓腔,这时可将针芯取出,连接注射器缓慢抽取骨髓组织,当注射器抽到少许骨髓时立即停止抽吸,取下注射器将骨髓推注到载玻片上,迅速涂片数张,以备染色镜检。左手压住穿刺点周围皮肤,右手迅速将穿刺针拔出,用干棉球压迫穿刺点数分钟。
3 采集后相关事宜处理
将动物穿刺部位用无菌敷料包扎,然后把动物送交饲养人员监护复苏。