心脏血容量超负荷常见原因是主动脉瓣或二尖瓣或三尖瓣关闭不全,房间隔、室间隔缺损及动静脉短路等。造成动物心脏血容量超负荷常用的试验方法是腹主动脉与下腔静脉吻合以形成动静脉短路。
1.动、静脉短路法
【造模机制】正常时动脉系统压力大于静脉系统压力。动、静脉短路使动脉系统的血液向压力低的静脉系统分流,分流值的大小主要取决于吻合口的大小和主动脉与下腔静脉的压力阶差。动、静脉血液分流,致静脉回心血量增加,加重心脏负荷,长期发展可致心衰。
【造模方法】
(1)犬:选用健康犬,用戊巴比妥钠静脉麻醉(25mg/kg)后仰位固定。在无菌条件下,沿中线打开腹腔后掀开肠腔至腹后壁,在肾动脉分支水平下即在肾动脉与髂动脉之间分离并游离腹主动脉和下腔静脉各约4cm,用血管夹夹住动脉和静脉两端以阻止血流,每条血管切开10~15mm的椭圆形口,然后用5-0丝线在切开的血管边缘进行边对边吻合。血流阻断最长在20~30分钟之间,动静脉吻合后松开血管夹,检查无出血后关闭腹腔。术后每天注射青霉素60万U和链霉素0.59约1周。待动物出现肢体水肿、腹水、活动后呼吸困难和发绀等心衰的体征和症状后即可进行急性实验,测量血流动力学指标和组织学及病理学检查。
(2)大鼠:选用雄性Sprague Dawley大鼠,于腹主动脉上左肾动脉起始部下2mm处,用无创血管夹阻断腹主动脉血流,穿刺腹主动脉及下腔静脉后,用黏着剂封闭穿刺点,术后笼养4周,大鼠心脏重量,体重比值明显增加,心肌出现肥厚,左室舒张末压显著升高,左室收缩力明显受损,产生心衰。或大鼠用8号针头在左肾下方0.8~1.0cm处斜行30°穿刺腹主动脉及下腔静脉制造心力衰竭模型。
【模型特点】此种方法建立慢性心衰模型可靠,临床拟似性较好。但建立此种模型需要较好的条件和设备,操作较复杂,成功率决定于技术水平。
【模型评估和应用】此种模型拟似临床高心输出量心衰,较多用于CHF时神经内分泌机制的改变、水电解质紊乱和肾功能异常以及药物实验性的研究。
2.主动脉瓣与二尖瓣关闭不全法
【造模机制】主动脉瓣关闭不全的主要血流动力学改变是在舒张期,血液自主动脉返流入左心室。因此,左心室在舒张期,要接受来自左心房血液和从主动脉返流的血液,导致左室充盈过度,左室逐渐扩大增厚,代偿期左室排出量可高于正常。失代偿时,心排出量降低,左房和肺动脉压力升高,可导致右心衰。二尖瓣关闭不全时,左室收缩时,血液即进入主动脉,也返流左心房,左室排出量降低。左房血量增多,压力升高,逐渐产生左房代偿扩大和增厚;左室舒张期充盈量增多,负荷加重,左室也逐渐扩大肥厚,持续发展可造成左心衰。
【造模方法】
(1)主动脉瓣关闭不全法:Wistar大鼠(200~300g),戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉,仰位固定。分离右侧颈总动脉,用一根硬质聚乙烯导管从右颈总动脉插入直到心脏,导管插到主动脉瓣处时反复用力损伤主动脉瓣瓣膜,使主动脉关闭不全。检测主动脉关闭不全是否形成的方法是测量主动脉压,舒张压低,脉压差变大。
(2)(2)二尖瓣关闭不全法:选用健康杂种犬,18~32kg,戊巴比妥钠25mg/kg静脉麻醉,仰位固定。用无菌操作,沿胸骨左缘第五肋间开胸暴露心脏,剪开心包。在左心房剪一小口,然后用食指压迫并通过小口,从二尖瓣膜顶端分离两根或数根心肌腱索并通过二尖瓣,使左房压升高至正常瓣膜压力的2.5~3倍。缝合左心房切口,分层关闭胸腔。术后给予大剂量青霉素和链霉素防止感染。每天观察,出现左室dp/dtmax降低、LVEDP升高、心脏指数下降、左心室功能指数降低、心输出量降低等血流动力学指标改变时,说明心衰已形成。
【模型特点】建立此模型需要一定的条件,而且动物死亡率较高。
【模型评估和应用】动静脉短路法建立慢性心衰模型与临床高心输出量心衰类似。主动脉瓣与二尖瓣关闭不全法建立的心力衰竭模型类似某些先天性心脏病或其他原因引起的瓣膜病,从这些模型上可获得不能从患者得到的某些重要资料。如果在同一动物建立主动脉瓣和二尖瓣关闭不全模型,这与临床上联合瓣膜病类似,对研究联合瓣膜病所致心衰的病因学、病理变化起重要作用。