(1) 将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1—2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃灭菌30分钟。

(2) 将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

(3) 取灭菌脱脂牛乳1—2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

(4) 用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。

(5) 将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。

(6) 将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。

(7) 需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。