酶切
(1) 反应体系的建立：
a.在一无菌1.5mlEppendorf管中加入：
无菌双蒸水7μl10×酶切缓冲液2μl
116
质粒DNA(100ng/μl)10μl
EcoRⅠ(5U/μl)1μl总体积为20μl
b.轻轻混匀，12000rpm离心5sec。
(2) 37℃水浴1h。
(3) 将Eppendorf管置65℃水浴中10min，通过加热使酶失活以终止反应。
(4) 12000rpm离心5sec，将管盖及管壁上的水离下。
(5) 取10μl消化产物，与2μl6×上样缓冲液混匀，琼脂糖凝胶电泳检测消化效果，电泳条件：约100V30～60min。
(6) 结果观察。
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