目的:探讨快速眼动睡眠(REMS)剥夺24 h对青少年期和成年期C57BL/6J小鼠焦虑行为和海马一氧化氮(NO)水平影响的差异。
方法:采用青少年期(3~4周龄)和成年期(8~12周龄)的C57BL/6J小鼠各45只,每个年龄组的实验动物分别平均随机分为3个亚组,每个亚组的小鼠数量为15只:正常对照(NC)组、大平台(WP)组和REMS剥夺24 h(REMSD)组。采用小平台水环境法制作REMS剥夺模型,通过高架十字迷宫测定实验动物焦虑行为。之后,低温下迅速处死实验动物,取脑分离出海马,裂解并匀浆离心后取上清液,通过酶标仪测定NO水平及Western blot测定海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS)含量。通过以上方法,分别观察REMS剥夺24 h对青少年期和成年期C57BL/6J小鼠焦虑行为、海马NO水平及nNOS蛋白表达的影响。
结果:(1)青少年期小鼠NC组、WP组和REMSD各组进臂总次数、进入开放臂次数和时间、以及进入封闭臂次数和时间均无明显差异;REMSD组海马NO水平明显高于NC组和WP组(ps<0.01);REMSD组海马nNOS蛋白水平明显高于NC组和WP组(ps<0.01);(2)成年期REMSD小鼠进臂总次数明显高于WP组和NC组(ps<0.01);小鼠进入开放臂的次数和时间明显低于WP组(P<0.01)和NC 组(P<0.01),而进入封闭臂的次数和时间明显多于WP组(P<0.01)和NC 组(P<0.05);成年期小鼠NC 组、WP组和REMSD各组海马NO水平和nNOS蛋白表达无显著性差异。
结论:REMSD 24 h对青少年期和成年期C57BL/6J小鼠焦虑行为的影响不同,可能与睡眠剥夺导致的海马NO水平和nNOS蛋白表达变化的差异有关。