一、术前准备
动物的术前准备是保证手术成功的一个重要环节,但容易被忽视,造成术中不必要的忙乱,甚至导致手术的失败。因此,实验者应自动物的购入、饲养、管理等环节开始,做好术前准备工作。
1.手术用动物的购入
购入或领取动物前,应向有关部门索取由国家主管部门所颁发的与所用动物相等级的质量合格证书、动物的遗传背景、微生物检查资料及动物年龄、体重、胎次等资料。根据实验时间长短的需要,同时准备相应数量的饲料和垫料。若是从外地购入动物须长途运输时,应考虑途中各种因素对动物的影响,如运输、环境的温度、湿度、饮食等,注意避免动物途中窒息死亡及污染。若是购入或领取清洁级以上的实验动物,应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或过滤帽的笼盒运输,严格检查其密封情况。检查动物健康状况,以外观为主。主要内容包括:①皮毛:有无光泽、出血、干燥;②眼:有无眼屎、流泪等;③四肢:有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎等;④肛门:有无下痢、血便、脱肛等。
2.术前的饲养和管理
在手术前几天要注意观察动物的饮食情况。术后需要单独饲养的动物,术前数天就要单独放在一个笼内,使其适应新的环境。对猫、狗、猪或灵长类大动物,在术前8~12h应予禁食,以免麻醉或手术过程中发生呕吐。家兔及啮齿类动物无呕吐反射,术前通常无须禁食。当然,如果进行胃肠道手术,所有动物术前均应禁食6~8h。另外,术前应观察动物的体温、呼吸、心率和血压,大动物最好在术前做血常规和凝血功能检查。
3.动物的抓取和固定
实验人员在进行动物实验时,须注意正确抓取动物,以免受伤或伤害动物。抓取和固定动物的方法依实验内容和动物种类而定。抓取和固定动物前,须对各种动物的一般习性有所了解。抓取固定时,既要小心仔细,避免粗暴;又要准确,迅速,力争在动物感到不安前抓取。
4.术前备皮
动物术前一天,应做全身皮肤被毛的清洁处理。手术区被毛较长或厚密者,应予除毛。除毛的方法有拔毛、剪毛、剃毛和脱毛四种,根据不同动物和不同手术方式,联合使用或分别使用。除毛多在动物固定后进行。合作的动物,可在麻醉前完成,不合作的动物,可在麻醉诱导后或基础麻醉下进行。用化学药品脱毛时一般先剪剃,再用脱毛剂脱毛。应用时用棉球蘸上脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2~3min后,用温水洗去脱落的被毛即可。常用脱毛剂配方为:①硫化钠8g,溶于100ml水中;②硫化钠8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g、加水75ml;③硫化钠8g、淀粉7g、肥皂粉1g、加水适量,调成糊状(以上配方适用于小动物如家兔,大白鼠,小白鼠等的脱毛);④硫化钠10g、生石灰15g、水100ml(此配方适用于大动物脱毛)。
二、术后处理
同人类手术一样,实验动物手术后,由于手术麻醉、组织损伤、手术时细菌污染等因素,可能导致多种术后并发症的出现,甚至危及动物的生命。因此,认真、仔细的术后处理,同手术本身一样重要。
1.术后的一般护理
术后动物应有专人观察,每日做好详细记录,以便他人了解动物的治疗和恢复过程。不同种类的动物与人接触,其反应不尽相同。对一些小的啮齿类动物,过度的接触和关心,反而会产生有害的应激反应。但对多数动物而言,安慰性的护理是有益的。在术后的麻醉苏醒期内动物通常需要一个特殊的苏醒场所,保持温暖、安静,灯光尽量柔和。室温以25℃~30℃为妥,切忌置于低温下。低体温休克是动物实验后死亡的一个重要原因,较为理想的条件是使用动物孵箱,可以装备一台带有动物孵箱和其他苏醒设备的苏醒车,根据需要在实验室中移动使用。多数情况下,小动物可置于平时饲养的笼中,在苏醒室或动物孵箱中苏醒。垫料以毛巾或毯子为佳,避免使用会黏附在动物口、眼、鼻或伤口的垫料,如木屑或刨花等。
2.术后常见问题的处理
(1)疼痛:术后疼痛可引起实验动物行动异常、嘶叫、饮食异常、心率加快、甚至循环衰竭等,因此,常须对其予以适当处理,主要是应用镇痛药缓解疼痛。镇痛药大致分为两类:①非甾体类抗炎药,如阿司匹林、对乙酰氨基酚(扑热息痛)等;②阿片类止痛药,如吗啡,哌替啶,丁丙诺啡等。如果手术相对较小,可仅给予一定剂量的止痛药。对于一些损伤性较大的手术,如剖腹术、开胸术、开颅术等,术后24~48h应连续给阿片类止痛药。
(2)呕吐、反流和坠积性肺炎:术前禁食可减少术后呕吐。当发生呕吐时,应调整动物体位,使其头部低于胸部和腹部,并采用负压吸引或50ml注射器清除口腔或咽喉部的呕吐物。如已发生呕吐误吸,应立即吸氧,并应用皮质激素,同时予以广谱抗生素。对气管插管的动物,当动物有自主吞咽或咳嗽时,就可以考虑拔管。
(3)呼吸抑制:术后呼吸抑制常常与麻醉有关,选择适当的麻醉方法和药物剂量,可减轻术后的呼吸抑制。术后应仔细观察动物的呼吸频率和幅度,有条件时可采用脉搏血氧饱和度仪持续监测呼吸功能。如果呼吸抑制明显,可使用呼吸兴奋剂,并予吸氧。术后持续吸氧对多数动物是有益的。对于在孵箱中苏醒的小动物,可直接经管道向孵箱内持续供氧;而大动物可用普通吸氧管固定于鼻孔前吸氧。、
(4)饮水不足:术后应记录动物的摄水量,可根据供应总量的剩余水量粗略估计。多数情况下体重下降代表液体缺乏,通过监测术前和术后的体重变化可较好地指导补液量。如果动物完全清醒,最好通过口服补充液体。如果动物不能或不愿口服,可采用皮下或腹腔内注射葡萄糖盐水补充液体。如脱水严重,则通过静脉补液。
(5)伤口感染:注意手术的无菌操作是预防术后伤口感染的主要措施。多数动物对感染的抵抗力强,无必要在术后常规使用抗生素。对已出现伤口感染者,则可考虑采用抗生素治疗。