(一)安死术
很多实验最终需要处死动物取材,动物的处死需要遵循实验动物福利和伦理的要求,按照人道主义原则实施安死术。对小型猪实施安乐死最好的一种方法是在应用镇静剂后建立静脉通道,然后超剂量静脉注射戊巴比妥钠(>150mg/kg)。其他的安死术包括在麻醉的状态下静脉注射2mmol/kg的KCl或者放血处死,下面介绍麻醉后放血的方法。
1.操作程序
(1)常规麻醉。
(2)将猪侧卧于解剖台(架)上。
(3)左手拉起一侧后肢,右手持手术刀在股三角部位做大切口,同时切断股动脉和静脉。
(4)用温水不断冲洗出血部位,防止凝血。
2.注意事项
(1)确保足够的麻醉深度,避免猪的痛苦和挣扎。
(2)切开股动脉时会有血液喷出,可以用大方巾遮挡或下压放血侧猪腿。
(3)若放血不够充分,可以用同样方法剖开另一侧股动脉。
(二)解剖
1.操作程序
(1)解剖时通常让猪呈左侧卧位。
(2)以解剖刀深深地刺入右侧腋窝,扩展切口上至下颚,下到肛门(将刀插入皮下组织,向外切),掀开皮肤,切开右髋关节,打开后膝关节,折断后腿,检查腹股沟淋巴结。
(3)沿肋侧打开腹腔,再将腹侧切口延伸到盆腔,向腹侧掀开皮肤。
(4)刺穿膈肌并切开,切断肋骨,打开胸腔。
(5)检查腹部和胸腔,如果出现渗出、粘连、纤维或其他病理学变化,则采集组织作微生物学培养和组织病理学检查,此时也可以进行血液和尿液采集。
(6)原位打开心包并检查。
(7)将两侧下颚骨中央的连接组织切开,游离舌头,将舌头向外拉向头侧,切断舌骨,沿椎骨切开软组织,游离颈部和胸部脏器的连接。
(8)检查口腔,检查局部淋巴结,切开舌头,打开食管。
(9)触摸检查肺脏,打开气管和主要的气道,切去支气管淋巴结,打开心脏。
(10)检查胆囊是否肿胀。
(11)压缩直肠的粪便,结扎直肠,剪开直肠的远端,以钝性和锐性剥离游离整个肠道。
(12)切除双侧肾上腺,并以解剖刀切开。
(13)通过牵拉输尿管取出肾脏,剥开肾囊膜,切开至肾盂并检查,打开膀胱。
(14)检查取出生殖器官。
(15)取出脾脏并切开。
(16)剥离头部的皮肤和肌肉,弯折头部确定寰枕关节,切开至关节的腹侧表面,如果需要可收集脑脊液,切开关节和颈部的肌肉,取下头部。
(17)取下头盖骨,剥离大脑,检查脑膜,取组织用于培养和组织病理学检查。
(18)展开肠道,打开胃、十二指肠,以及空肠、回肠、盲肠、升结肠和降结肠的片段,如果需要采集组织。
2.注意事项
(1)解剖从外表特征检查开始,就像临床检查的描述一样。
(2)如果发现动物已经死亡,而且出现角膜浑浊、腹部染成绿色,则解剖的意义不大,因为此时动物已经发生尸溶。
(3)通常情况,在解剖过程中最后检查胃肠道,如果临床问题与胃肠道有关,则应尽可能早地检查胃肠道,因为胃肠道在动物死后迅速开始尸溶。