遗传监测是定期对动物品系进行遗传监测的一种质量管理制度,下面就具体实施过程进行说明。
1.近交系小鼠、大鼠遗传监测方法及实施
(1)生化标记基因检测(biochemical markers):本方法是近交系动物遗传纯度常规检测中的常规方法。①抽样:对基础群,凡在子代留有种鼠的双亲动物都应进行检测。对于生产群,雌性种鼠数量在100只以下的,从每个近交系中随机抽取成年动物6只;雌性种鼠数量在100只以上的,随机抽取量应≥6%,雌雄各半。②生化标记基因的选择及常用近交系动物的生化遗传概貌:近交系小鼠选择位于10个染色体上的13个生化位点,近交系大鼠选择9个生化位点,作为遗传监测的生化标记。以上生化标记基因的名称及常用近交系动物的生化标记遗传概貌见《实验动物 哺乳类实验动物的遗传质量控制》(GB 14923-2010)附录B。③检测结果判断见表7-11。
表7-11 对遗传监测结果的判定
(2)皮肤移植法(skin grafting):每个品系随机抽取至少4只相同性别的成年动物,进行同系异体皮肤移植。移植全部成功者为合格,发生非手术原因引起的移植物排斥判为不合格。
(3)检测时间间隔:近交系动物生产群每年至少进行一次遗传质量检测。
2.封闭群动物的遗传监测 封闭群动物的遗传组成不如近交系稳定,以基因频率或数量遗传参数来表示封闭群动物的遗传结构有一定的误差。因此,封闭群动物的遗传监测比较困难。
封闭群动物的遗传监测一般可从以下几方面进行:
(1)观察种群的基本形态,如毛色、体型、体重、体长、尾长等。
(2)生理常数测定,如白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板等。
(3)生殖常数测定,如性周期、生殖周期等。
(4)发育繁殖能力的观察,如离乳率、产仔率、受孕率、胎间隔、仔鼠体重等。
(5)某些生化位点和免疫遗传学标记测试,计算各位点的基因多态性和基因频率。
(6)下颌骨测量点的形态数据分析,以判断是否保持原有群体的特点。
综上所述,建立完善的遗传监测制度非常重要,定期进行遗传监测,按照规定的数量进行送检,是保证实验动物遗传质量的前提。在某些情况下,由于遗传污染造成的损失比微生物污染的损失大,严重的甚至无法弥补,在这方面无论国内国外都有许多深刻教训,绝不可掉以轻心,疏忽大意。