离体大鼠心脏冠状动脉结扎缺氧模型

来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 发布时间:2017年01月25日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

(1)复制方法  体重210~290g雄性Wistar大鼠,按45mg/kg体重的剂量腹腔注射戊巴比妥钠麻醉。静脉注入肝素2mg后开胸取出心脏,以70cm H2O(6.86kPa)在恒温恒压灌流装置上灌流。灌流液为富氧含8mol/L葡萄糖的 K—H溶液。用3×6号医用缝针00号医用缝线在冠状动脉前降支起始部穿越冠状动脉深处作一待扎缝线,打结拉紧该线即可阻断该支动脉。结扎后要解除结扎再灌注者在该缝线与待扎组织间填一直径约1.5mm的塑料丝。解除结扎时先拔出该塑料丝,再剪断结扎线。灌流分三个阶段:①预备灌流期:用含8mM葡萄糖的富氧K—H溶液灌流5min,使心脏达到稳定状态。②冠状动脉结扎期:结扎冠状动脉前降支,结扎期限为10、15、30及60min。③恢复灌流期:解除结扎,使原结扎区再获得含8mM葡萄糖的K—H溶液灌流20min。灌流液流量的测定:收集并测量1min内经心脏冠状血管流出的流量,以ml/min表示。以预灌期的3.5~4.5min时之流量为基础流量。结扎期分别取结扎后3.5~4.5min时之流量为结扎期初流量;以解除结扎前1.5~0.5min时之流量为结扎期终流量。复灌期分别取结扎解除后3.5~4.5min时之流量为复灌期初流量,18.5~19.5min时为复灌期终流量。以基础流量为100%,其他时期的流量与其比较为相对流量。灌流结束后,取下心脏,立即在冠状动脉内注入4ml pH 7.4,0.1mol/L磷酸缓冲液配置的6%戊二醛作灌注固定,分别在结扎区和非结扎区取材,作电镜和光镜组织切片,进行组织学检查。

(2)模型特点  离体大鼠心脏冠状动脉结扎缺氧模型可对离体大鼠心脏进行不同缺氧时间和不同缺氧方式的实验,结果表明不仅离体大鼠心脏的全心缺氧灌注可以反映出心肌缺氧的一些共同特征,在离体灌流大鼠心脏上结扎其冠状动脉也可造成缺血性心脏病的病理特征。

(3)比较医学  本方法制备的模型与在体心脏冠脉结扎一样均可以复制出心肌缺氧的特征性改变,且心脏的活动既没有神经调节,也没有激素等体内其他调节物质的参与,实验条件单纯、易控;同时同一标本上有缺氧和非缺氧两个区域,便于自身对照。但结扎区仍有一定的侧支循环补偿是有别于整体缺氧灌流的。

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