目的:过表达、敲低或抑制Smad3的活性,探讨Smad3对非小细胞肺癌A549细胞和宫颈癌HeLa细胞迁移的影响。
方法:设计扩增Smad3基因全长编码序列cDNA的引物,通过分子克隆技术构建pCMV-Myc-Smad3过表达载体,同时设计并合成靶向Smad3的siRNA序列,在A549和HeLa细胞中过表达或敲低Smad3,或者利用Smad3的抑制剂SIS3 2 μM处理细胞,采用细胞划痕的方法研究Smad3对A549和HeLa细胞迁移的影响。
结果:利用分子克隆技术成功构建pCMV-Myc-Smad3过表达载体。过表达Smad3促进A549和HeLa细胞的迁移。敲低Smad3抑制A549和HeLa细胞的迁移。SIS3抑制Smad3的活性导致A549和HeLa细胞的迁移速率变慢。
结论:Smad3促进A549和HeLa细胞的迁移。