目的： 探究树鼩原代小肠上皮细胞的增殖特性，建立人轮状G1P[8]型病毒体外感染树鼩原代小肠上皮的细胞模型。

方法： 采用胶原酶XI和中性蛋白酶I联合消化法获取树鼩原代小肠上皮细胞，经纯化和鉴定，用人轮状G1P[8]型病毒感染细胞，测定培养上清的病毒滴度和载量，并用Western blot和间接免疫荧光检测法检测人轮状病毒G1P[8]型VP6蛋白的表达情况，评价人轮状G1P[8]型病毒体外对树鼩原代小肠上皮细胞的感染性。

结果： 分离的树鼩原代小肠上皮细胞经传代培养纯化，获得纯度达90%树鼩原代小肠上皮细胞。对树鼩原代小肠上皮细胞、原代肾细胞、HCT116细胞和MA104细胞进行轮状病毒易感性比较，确定树鼩原代小肠上皮细胞可以被人轮状病毒G1P[8]感染，培养72 h时病毒滴度可达到2.0×10⁵ TCID₅₀/mL。经Western blot和间接免疫荧光发现在人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞1~5 d均能检测到人轮状病毒VP6蛋白的表达和分布。

结论： 确立了树鼩原代小肠上皮细胞的分离、纯化与培养方法，并建立了人轮状G1P[8]型病毒感染树鼩原代小肠上皮细胞的体外模型。

全文阅读：人轮状病毒G1P[8]型感染树鼩原代小肠上皮细胞模型的建立