目的： 详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞（neural stem cells，NSCs）所占比例，为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。

方法： 分离不同胎龄小鼠全脑（胎龄12.5、14、16和18 d）和大脑皮层（胎龄14、16和18 d）组织，消化成单细胞悬液，贴壁培养3~4 h，细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin，统计分析各组中NSCs所占比例。另外，通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄（12.5、14、16和18 d）小鼠大脑皮层中的表达水平。

结果： 细胞免疫荧光结果显示，分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高，为53.42%±1.57%；胎龄18 d组NSCs所占比例最低，为25.96%±1.31%，而胎龄14 d组和16 d组位于二者之间。在分离培养的不同胎龄小鼠大脑皮层组织中，胎龄14 d组NSCs所占比例最高，为33.65%±0.29%；胎龄18 d组比例最低，为25.29%±0.28%，胎龄16 d组位于二者之间（26.82%±0.30%）。实时荧光定量PCR结果显示，当把胎龄12.5 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA表达水平设定为1，胎龄14 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA的相对表达量为0.83±0.04，胎龄16 d组为0.77±0.05，胎龄18 d组为0.44±0.05。因此，随着小鼠胎龄增加，小鼠大脑皮层中的Nestin mRNA的表达水平逐渐下降。

结论： 在小鼠大脑发育过程中，随着胎龄增加，分离培养的小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞比例逐渐降低。

全文阅读：不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究