目的: 探讨miR-143通过负向调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)抑制食管癌细胞的增殖。
方法: RT-PCR法检测食管癌细胞TE-1、EC109、EC9706、KYSE150、KYSE510、SEG-1及人正常食管上皮细胞HEEC中miR-143表达,使用脂质体LipofectamineTM 2000将miR-143 mimics和miR-143 NC转入EC9706细胞中,48 h后,RT-PCR法检测miR-143表达,CCK-8法检测细胞活力,EdU染色检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR及Western blot检测Bcl-2蛋白及mRNA的表达。
结果: miR-143在食管癌细胞TE-1,EC109,EC9706,KYSE150,KYSE510及SEG-1中的表达量[(1.36±0.13),(1.08±0.10),(0.89±0.09),(0.95±0.09),(1.32±0.14),(0.96±0.11)]显著低于miR-143在人正常食管上皮细胞HEEC(2.38±0.15)中的表达量(P< 0.01)。与miR-143 NC组比较,miR-143 mimics组miR-143表达量显著升高(P< 0.01),细胞活力下降(P< 0.01),细胞增殖能力降低(P< 0.01),细胞周期阻滞在G1期(P< 0.01),同时Bcl-2蛋白及mRNA表达量显著降低(P< 0.01)。
结论: miR-143过表达能通过下调Bcl-2表达抑制EC9706细胞增殖。