1.代谢笼采集尿液 将动物放在特制的笼内饲养(图1.1),动物排便时,可通过笼子底部的大小便分离漏斗,将尿液与粪便分开,达到采集尿液的目的。
2.输尿管插管采集尿液 在动物输尿管内插一根塑料套管收集尿液。适用于兔、猫、犬等。常用于一侧肾功能研究时分侧收集尿液。以兔为例,操作方法如下:用20%氨基甲酸乙酯静脉麻醉家兔(5ml/kg),仰卧固定在实验台上。于耻骨联合上缘向上沿正中线作4cm长皮肤切口,再沿腹白线剪开腹壁寻找膀胱,将其翻出腹外,在膀胱底两侧找到输尿管。在输尿管靠近膀胱处,用细线扣一松结,以玻璃分针或有钩小镊提起输尿管管壁,于输尿管上剪一小口。从小口向肾脏方向插入一根适当大小的细塑料导管,并将松结打紧以固定插管,这时可见尿液慢慢由导管流出。如图1.1所示,将导管开口固定于记滴器上,记录单位时间内尿液滴数。将滴下的尿液用量器收集,测其尿液量。实验过程中,应用温生理盐水纱布,将手术部位覆盖,以保持动物腹腔温度和湿润肠管。
3.尿道插管采集尿液 以雄性家兔尿液的收集为例,一般用2kg以上的雄兔,按30~60ml/kg给兔灌水,1h后用25%乌拉坦溶液4ml/kg耳缘静脉麻醉,将家兔固定于兔台上,由耳缘静脉以每分钟2ml速度注入5%葡萄糖盐水,由尿道徐徐插入导尿管(顶端应先用液体石蜡涂抹),一般均无阻力。插入深度约22cm左右,可根据动物大小而定。当导尿管插入膀胱时,尿液立即从管中流出,证明插入正确(图1.2),用胶布将导尿管固定好,压迫下腹部排空膀胱,然后收集正常尿液,给药后再收集尿液。在收集尿液期间应经常转动导尿管。
4.膀胱手术插管采集尿液 一般用于犬等较大动物,麻醉后固定于手术台上在下腹部做手术切口,长约6~8cm,从切口处取出膀胱,将金属套管插入膀胱,套管应当用小型而其底的边缘应向下翻成杯状,以免当膀胱缩小时损伤膀胱壁。用粗线在膀胱体部的前壁穿过肌肉层作一椭圆形荷包口缝线。在荷包缝线下面用手夹住膀胱体部,然后顺着荷包口缝线的长轴切开膀胱,两端保留长约3~4mm的边缘。用小钩钩住切口的两端,将套管底盘插入膀胱腔内,随后把荷包口缝线结扎紧。然后将套管固定在腹壁切口上,同时缝合腹壁切口。平时用套管塞塞住瘘管口,实验时将其打开,用橡皮带将一漏斗绑到膀胱瘘管上,漏斗下面放小瓶收集尿液。
5.穿刺膀胱采集尿液 此方法具有快速、方便和对尿道损伤小的优点。以犬为例,操作方法如下:将犬麻醉后仰卧并固定于手术台上,剃去腹正中线区域皮毛,在耻骨联合上方准备穿刺点处消毒后,用左手触摸并固定膀胱,右手持事先准备好的连有5ml注射器10cm长的粗针头经皮刺入膀胱,入皮后针头应稍改变一下角度,以免穿刺后漏尿。刺入时慢慢深入,边进边抽吸,以抽出尿液为度。穿刺位置在耻骨联合上18cm,如一次抽不到尿液,需拔出针头重新刺入。抽到尿液后用左手固定针头,取下针筒,再选用5号儿童导胃管经针头管道插入膀胱内,直到尿液从导管流出,然后轻轻拔出针头,留置导管,用缝一针法固定导管,以免滑脱,将导尿管尾端夹一静脉夹,可以定时控制尿液的收集和排放。
6.压迫膀胱采集尿液 在有些动物实验中,常为了某种实验目的,要求间隔一定的时间采集一次尿液,以观察药物的排泄情况。动物轻度麻醉后(20%氨基甲酸乙酯静脉麻醉家兔5ml/kg),实验人员用手在动物后腹部加压,手要轻柔而有力。当压力足以使动物膀胱括约肌松弛时,尿液就会自动由尿道排出,如图1.3。此法适用于家兔、猫、犬等较大动物。
7.剖腹采集尿液 术前准备同上述穿刺法。皮肤切口范围应大一些,剖腹暴露膀胱,用无齿镊夹住一小部分膀胱壁,然后将针在小镊夹住的膀胱部位直接穿刺抽取尿液。抽尿时,应避免针头贴在膀胱壁上而抽不出尿液。
8.反射排尿采集尿液 这种采集尿液的方法适用于小鼠,因小鼠被人抓住尾巴提起时排尿反射比较明显。当实验需要采取少量尿液时,可提起小鼠,将小鼠排出的尿液吸取,供实验用。