目的: 通过对离体神经细胞培养及大鼠在体脊髓损伤模型施予 BoNT/ A 重链,观察损伤局部组蛋 白乙酰化水平的变化,为探讨 BoNT/ A 重链干预神经细胞再生的分子机制提供实验依据。
方法: 将 BoNT/ A 重链 加入细胞培养液或在脊髓损伤模型基础上局部给予小剂量 BoNT/ A 重链;收集细胞及损伤局部脊髓组织,采用免 疫荧光、SDS⁃PAGE 和 Western blot 等方法对细胞和脊髓组织内选择性组蛋白亚类的乙酰化水平进行检测。
结果: 不论是体内应用还是培养液内加入 BoNT/ A 重链,细胞和组织内组蛋白 3 的乙酰化水平皆明显增多; BoNT/ A 重链 所致的 Neuro⁃2a 细胞组蛋白 3 乙酰化水平的增高与神经突起的增长相匹配,即同一时间点组蛋白乙酰化水平显著 增高的同时,神经突起的生长也呈显著增长;脊髓损伤基础上给予 BoNT/ A 重链所显示的组蛋白3 乙酰化的表达量 增高呈现双时相高峰(2 h 和 48 h)。
结论: BoNT/ A 重链可促进组蛋白 3 的乙酰化;在同一时间点,组蛋白 3 的乙 酰化水平与神经突起增长的长度相一致;组蛋白 3 乙酰化可能是 BoNT/ A 重链促神经突起生长的相关机制之一。