目的: 以斑马鱼为模型筛选金线莲具有降血糖效果的活性组分,并进行初步的机理研究。
方法: 对金线莲进行分离与提取,分成三个组分: 金线莲醇提物、大分子多糖(≥5 × 10 3 )和小分子多糖( < 5 × 10 3 )。 将 发育至 24 h 的斑马鱼胚胎暴露于 2% 浓度的葡萄糖溶液(2% Glu)中,模拟急性高糖模型,待胚胎发育至 48 h 时再 分别加入三种组分,同时继续用 2% 葡萄糖溶液处理,72 h 时检测不同组分处理后幼鱼的组织液葡萄糖含量,筛选 出具有降血糖效果的活性组分。 利用半定量 PCR 和整胚原位杂交技术检测糖代谢相关基因 mRNA 水平的表达。
结果: 本研究利用高糖胁迫构建斑马鱼糖尿病模型,在该模型下,糖代谢关键因子胰岛素基因( preproinsulin, insulin)、磷酸烯醇式羧基酶 1 基因 ( phosphoenolpyruvate carboxykinase 1, pck⁃1 )、胰腺十二指肠同源盒基因 1 (pancreatic and duodenal homeobox 1, pdx⁃1)的表达都发生了明显改变,金线莲醇提物能够改善这些基因在高糖胁迫下引起的异常表达,甚至恢复到正常水平。
结论: 金线莲醇提物对斑马鱼高糖模型具有明显的降血糖功效, 该研究为斑马鱼作为糖尿病模型用于探索降血糖药物提供了实验思路和手段。
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