CRISPR/Cas9介导的小鼠BRCA1/BRCA2/CDH1基因乳腺特异性修饰研究

来源:中国比较医学杂志2018年第8期 发布时间:2018年10月18日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

目的:应用CRISPR/Cas9系统构建BRCA1、BRCA2和CDH1三基因乳腺特异性修饰小鼠模型。

方法:针对小鼠BRCA1、BRCA2和CDH1基因分别设计并合成sgRNA,构建pX330⁃spCas9⁃U6⁃gRNA共表达载体,将共表达载体中CBh启动子替换为乳腺组织特异性启动子WAP。利用小鼠受精卵原核注射的方法制备转基因小鼠。

结果:共注射受精卵190枚,得到活性受精卵130枚,移植4只受体鼠。产下F0代仔鼠42只,鉴定出11只转基因阳性小鼠,阳性率为26.19%。F0代阳性鼠繁育后得到39只F1代仔鼠,其中9只为F1代转基因阳性鼠。

结论:通过构建乳腺组织特异表达Cas9载体成功制备了转基因阳性鼠。

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