目的:探讨维生素D受体(VDR)基因敲除小鼠的最优繁育方式与鉴定方法,为进一步研究VDR功能及相关疾病提供动物模型。
方法:针对课题组前期构建的VDR敲除小鼠,采用4种不同的交配方式产生子代 小鼠,统计子代的表型和基因型,比较VDR基因敲除纯合子(VDR-/ -)和杂合子(VDR+/ -)小鼠的繁殖能力,同时 在mRNA和蛋白水平分析VDR表达情况。
结果:VDR-/ -小鼠与VDR+/ + 小鼠在表型上具有显著差异,主要表现 在脱毛、体型小和活动能力下降等方面;4 种繁育方式所产子代小鼠的基因型分布基本符合孟德尔遗传定律; VDR-/ -互交方式小鼠的生殖能力差,不能直接用于扩大VDR-/ - 敲除鼠品系,而VDR+/ - 互交方式可成功获得 VDR-/ -小鼠,并且检测到VDR基因敲除性状能稳定遗传至子代小鼠,因此该方法是扩大品系的最佳途径。
结论:本实验成功鉴定出子代小鼠基因型并建立VDR基因敲除小鼠品系,为后续VDR功能研究奠定基础。
全文阅读:维生素D受体基因敲除小鼠品系的建立与鉴定