对于科研老司机来说,给小鼠分组编号这事想必是日常操作之一了，但是对于许多才上手养小鼠的新手来说还是有很多细节是不清楚的，比如什么时候给小鼠分笼、分笼应考虑哪些问题、如何给小鼠编号等。分笼编号这件事虽然简单，但这是做好实验和实验记录的前提。今天我们就来聊一聊小鼠的分笼与编号。

分笼

1. 什么时候分笼？

• 大小鼠的哺乳期是20-22d，3周龄可离乳独立生活，因此出生3周后即可将幼鼠与母鼠分开，独立生活。
• 视小鼠生长情况，可多哺乳几天。有时为避免笼盒中同时存在两胎幼鼠，导致新生的幼鼠被上一胎幼鼠踩踏致死的情况，在19d左右即可将其分笼。
• 雌鼠4周龄阴腔开张，雄鼠5周龄睾丸降落至阴囊，开始形成精子。因此，4周龄前一定要进行分笼，以免发生交配。

 

2. 分笼注意事项

• 若使用镊子，镊子需充分消毒。
• 如果不需要配种，雌雄不要混放在一个笼盒，以免发生交配；
• 不同品系的幼鼠不能放一个笼盒，因为有些品系外表相似难以区分，有些品系好斗容易打架。
• 为防止打架，不同窝的雄性幼鼠不要轻易放一起。如果不得不放一起，离乳时就放一起，越早越好。
• 分笼完毕后要登记原繁殖笼盒的繁殖信息（出生幼鼠的雌雄数量、分笼时间等）和新分出幼鼠的信息（小鼠品系、出生日期、数量、来源亲本、分笼日期等）并填写实验动物繁殖卡。

编号

编号的方法很多，应综合考虑动物特点、实验周期等来选择，但无论选择哪种编号方法，所遵守的基本原则是：号码清楚、持久、减便、易认、对动物伤害小。

1. 皮肤染色标记法

使用化学药品在动物明显部位被毛上进行涂染以识别动物的方法。

常用的涂染化学药品：

红色：0.5%中性红或品红溶液

黄色：3%-5%苦味酸溶液或80%-90%苦味酸酒精饱和液

咖啡色：2%硝酸银溶液

黑色：煤焦油酒精溶液

编号方法：用毛笔将药品涂于动物体表的不同部位，以小鼠为例，各个部位所表示的号码如图所示。编号原则：先左后右、从前到后。用不同的颜色表示个位和十位数，可编1-99号。

图一：皮肤染色标记法

适用情况：一般适用于白色大小鼠短期的实验。

优缺点：方法简单，动物不受到伤害，由于动物之间被毛互相摩擦，尿、水浸湿被毛等原因可能导致编号颜色变浅甚至消失，在实验过程中需补涂染料，使编号清晰。

2. 尾部标记法

用不同颜色的油性记号笔在尾部标记。

编号方法：从1-10编号如图二所示

图二：尾部标记法，从左到右依次表示1-10号

适用情况：急性实验或实验时间短，动物数量少。

优缺点：方法简单，动物不受到伤害。但是标记的动物数量有限，记号容易消失，1-2天就需要重新标记。

3. 耳号钳打孔（缺）标记法

用耳号钳在耳上打洞或用剪刀在耳边缘剪缺口。

编号方法：

打孔（缺）的原则为左耳代表十位数，右耳代表个位数。在耳缘内侧打一孔，按前中后分别标为1、2、3；若在耳缘部打一个缺口，按前中后分别标为4、5、6，若是双缺口，则分别标为7、8、9。右耳中部打一孔表示100号，左耳中部打一孔表示200号，按此法可编至399号。                     

图三：小鼠耳号钳打孔（缺）标记法

适用情况：可用于长期实验以及各种毛色的动物。

优缺点：可编号的数目多，操作繁琐，动物受到损伤。应用此法时常用消毒滑石粉涂抹在耳孔（缺）局部，以防止孔缺愈合。

4. 耳牌标记法

用耳标签将耳标签（由塑料、铝或钢片制成的金属制牌号）固定于实验动物的耳上。使用时应注意标签的位置，建议放置在耳廓下边缘，因为放在耳廓背侧可能使耳朵折叠引起动物不适或痛苦。

图四：耳牌标记法

适用情况：用于各种毛色的动物、可长期使用。

优缺点：操作简单，编号数目不受限制，但是由于动物抓扯或没打好，耳标掉落需要重打，若是同一笼多个耳标掉落则无法通过排除法来确认掉落标签小鼠的编号。耳廓在两周龄之前没有发育，并且为了确保耳朵足够大以容纳标签，需要等到断奶。此外，在使用磁共振成像（MRI）系统的实验中，需要去除金属标签，因为它们会干扰磁场。刺激和炎症的风险似乎与标签中的金属以及动物携带它们的持续时间有关。

5. 断指（趾）标记法

对于新生仔鼠（8-12d），可根据前肢四指、后肢五趾的方式来标记，小鼠腹部面向人，后肢从左到右表示1-10号，前肢从左到右表示20、30、40、50、60、70、80、90，可编号1-99，配合穿耳孔法，左耳表示千位，右耳表示百位，可编至9999号。剪脚趾时不能只剪指尖，应剪掉一段指骨，以防伤口痊愈后辨认不清。

图五：断指（趾）标记法（图片仅供参考，具体参照文字说明）

适用情况：可用于长期实验以及体毛颜色较深不易着色的动物。

优缺点：操作简单并且剪下的指（趾）可用于基因型鉴定，适用于各种毛色的动物。此法可编号数多，编号可维持时间长。小鼠日龄超过12d不宜采用此法，否则会引起小鼠明显疼痛及失血过多。无论是在行为还是动物福利方面，采用此法最好选择7日龄以前的小鼠并与基因型鉴定相结合。

最后是科代表时间，给大家做个总结：

什么时候分笼？

大小鼠出生3周即可断乳独立生活，也可视情况提前或延迟分笼，但是4周龄前一定要进行分笼，以免发生交配。

如何编号？

常用的编号方法有以下四种：皮肤染色标记法、尾部标记法、耳号钳打孔（缺）标记法、耳牌标记法、断指（趾）标记法，选择哪种方法则需从动物毛色、实验周期、动物数量、操作难易以及对实验是否有影响等方面进行综合考虑。

编号方法	适用毛色	操作难易	持续时间长短	编号数目	注意事项
皮肤染色标记法	白色大小鼠	易	短 （一个多月）	1-99	实验过程中需补涂染料，使编号清晰
尾部标记法	各种毛色	易	短	1-10	记号容易消失，1-2天就需要重新标记
耳号钳打孔（缺）标记法	各种毛色	难	长 （几个月）	1-399	用消毒滑石粉涂抹在耳孔（缺）局部，以防止孔缺愈合。
耳牌标记法	各种毛色	易	长	无限	由于动物抓扯或没打好，耳标掉落需要重打，若是同一笼多个耳标掉落则无法通过排除法来确认掉落标签小鼠的编号
断指（趾）标记法	各种毛色	易	长	1-9999	小鼠日龄超过12d不宜采用此法，否则会引起小鼠明显疼痛及失血过多

赛业生物：

赛业生物历经12年发展，已服务全球数万名科学家，赛业产品与技术已直接应用于包括CNS(Cell, Nature, Science)三大期刊在内的2030篇学术论文。2016年，TurboKnockout把ES打靶金标准推向新高度；同年，CRISPR-Pro使大片段敲入及条件性基因敲除变得更加高效；2017年，AlphaKnockout基因打靶专家系统首次实现基于人工智能的最优化方案设计；同年7月，推出万例CRISPR-AI敲除小鼠资源库。赛业一步一个脚印，踏实前行，助力中国科研！

参考资料：

1. 徐向明主编,实验动物技术,中国农业出版社,2008.12.

2. 邵义祥主编;王禹斌,朱顺星,周正宇副主编,医学实验动物学教程第3版,东南大学出版社,2016.06.

3. 陈世民,莫燕娜,赵善民主编;许小林,黄培春,马兰等副主编,实验生理科学,上海科学技术出版社,2011.07.

4. 申杰,王净净主编,医学科研思路与方法,中国中医药出版社,2016.07.

5. 邹莉波主编,药理学与毒理学实验第2版,中国医药科技出版社,2014.09.

6. K Dahlborn,P Bugnon,T Nevalainen,M Raspa,P Verbost and E Spangenberg.Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations Working Group on animal identification.Laboratory Animals 2013; 47: 2–11. DOI: 10.1177/002367712473290.

图片均来源于参考资料及赛业生物内部资料。