目的:本研究探讨苦参碱联合蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂对肾癌细胞增殖活力及凋亡的影 响及机制。
方法:以肾癌细胞为研究对象,用不同浓度的苦参碱作用后,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活力,计算半 数抑制浓度。 用半数抑制浓度的苦参碱和Akt信号通路抑制剂分别处理细胞记为苦参碱组和抑制剂组,同时以半 数抑制浓度的苦参碱和Akt信号通路抑制剂共同处理后的细胞为联合组,以正常培养的细胞为对照组,MTT检测 细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞中活性氧(reactiveoxygenspecies, ROS)水平,蛋白质印迹法检测细胞中 p38、磷酸化的 p38(p-p38)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleavedcysteinylaspartatespecificproteinase3,cleavedcaspase-3)表达。
结果:苦参碱能够呈浓度依赖的抑制肾癌 细胞增殖活力。 与对照组比较,苦参碱组、抑制剂组、联合组细胞存活率降低,凋亡率升高,ROS水平升高,p-p38水 平、cleavedcaspase-3蛋白水平升高。 与苦参碱组、抑制剂组比较,联合组胞存活率降低,凋亡率升高,ROS水平升 高,p-p38水平、cleavedcaspase-3蛋白水平升高。
结论:苦参碱联合Akt信号通路抑制剂能够抑制肾癌细胞增殖活 力,促进肾癌细胞凋亡,ROS和p38信号通路可能是其作用机制之一。