(1)复制方法 取戊型肝炎患者的急性期粪便样品,用0.1mol/L PBS缓冲液配制成10%悬液,经离心、滤菌后,经恒河猴后肢静脉注射,1.5ml/只。于造模预定时间采血作血清ALT检测,对感染HE的恒河猴粪便样品处理后进行电镜观察。模型制作结束时,麻醉处死动物,取其肝脏组织经10%甲醛溶液固定,作常规组织切片,HE染色,光镜下观察;另取肝组织作透射电镜超薄切片,电镜下观察。
(2)模型特点 注射感染后恒河猴均出现ALT异常,时间不超过2周,峰值可达感染前均值的2~5倍。注射感染后第17日,电镜观察可见,恒河猴粪便样品中有27~34nm大小的病毒样颗粒,具有实心与空壳两种形态,病毒颗粒间有明显抗体桥。肝脏病理组织切片可见,肝实质疏松坏死,大量淋巴细胞和少量中性粒细胞灶性浸润,中央静脉壁被破坏,淋巴细胞浸润,汇管区炎症细胞浸润。电镜超微结构观察表明,恒河猴肝组织内细胞包涵体中存在戊肝病毒大小的病毒样颗粒,已发生溶解坏死的胆囊上皮细胞碎片中可见聚集在一起的病毒样颗粒,胆囊组织细胞突起中有散在病毒样颗粒。
(3)比较医学 戊肝病毒感染后,模型动物发生病毒血症,感染后猴体肝脏发生典型急性肝炎病变,并伴随有ALT升高,HEV抗体阳转,粪便中可见病毒颗粒,表明恒河猴对戊型肝炎敏感,但其肝脏损伤较轻且恢复较快。HEV主要在肝细胞内复制,通过胆汁排出,并持续存在直至ALT恢复正常。模型猴于注射HE感染后第7日,其胆汁中的HEV RNA最高,通常于感染后2~3周出现抗HEV抗体,3~6周可达高峰,然后下降。模型动物的ALT水平、抗体应答、排毒等随动物个体差异而不同。非人灵长类动物感染人 HEV以后,常表现出与人感染HEV后极为相似的典型急性病毒性肝炎临床表现,表现为起病急、活动减少、厌食、尿色深、发热等。肝组织活检主要为典型急性炎症,并有局灶性肝细胞坏死,肝细胞呈气球样变性或溶解性坏死,胞质呈嗜酸性改变和凝固性坏死。因此,恒河猴HE感染模型具有十分重要的临床研究价值。