一、实验目的

周围神经损伤后影响外周神经修复的因素是神经生物学领域研究的热点。已知的证据表明，周围神经受损后参与神经再生的主要因素包括神经中枢和神经局部的微环境。本章建立了坐骨神经损伤动物模型，研究切断坐骨神经后行为学的变化情况，为进一步研究神经损伤修复的机制及策略提供基础。

二、实验原理

本研究运用机械性切割的方法制作了大鼠坐骨神经损伤动物模型，通过对坐骨神经传导速度测定、足底热刺激、足底机械刺激的方法对大鼠损伤的程度进行评价。

三、实验材料与方法

(一)实验材料

1.所需设备  电热压力蒸汽灭菌器；微量电子天平；电热恒温鼓风干燥箱；水平电泳仪；电热蒸馏水器；20μl、100μl、200μl、1000μl可调微量加样枪；手术器械：眼科剪、解剖剪、蚊式钳、有齿镊、无齿镊。

2.所需试剂  3.6％水合氯醛，75％乙醇，碘伏，8万U/ml青霉素钠，生理盐水，葡萄糖溶液。

3.试剂配制  3.6％水合氯醛溶液：称取0.36g的水合氯醛溶于10ml的蒸馏水中，混匀，现用现配。

(二)实验方法

1.实验动物及饲养环境  该动物模型采用雌性SD大鼠，年龄为3月龄，体重(200±10)g。实验动物饲养室的温度为18～19℃，相对湿度为40％～70％，每小时换气次数为10～20次，噪声在60dB以下，每立方米空气中氨浓度在14mg以下，工作照度为150～300lx。每天喂料、喂水，垫料每周更换2～3次，造模损伤后分笼饲喂。

2.坐骨神经损伤  10只成年SD大鼠分为两组，假手术组5只，实验组5只，分为1d组、2d组和7d组。给大鼠右下腹剃毛消毒，于腹股沟中点上方0.5cm进针，3.6％水合氯醛(1ml/100g)腹腔注射麻醉。麻醉过程中注意保温，详细记录每只大鼠的手术开始及结束时间，并估计失血量，以便术后治疗、护理。

将各个实验组的动物固定在手术台上，手术刀划开皮肤，剥离臀大肌，暴露粗大的坐骨神经，用镊子和刀背钝性分离后，手术刀片切断左侧坐骨神经，确认离断后，进行消毒缝合。

术后处理：损伤完毕后，对动物进行保暖，待其自然苏醒后，将动物分笼饲养，自然光照、通风：并勤换清洁、干燥的饲养笼垫料，始终保持干燥；被尿液浸湿的肢体及时用温肥皂水清洗，并用电吹风吹干；加强营养，喂食鸡蛋、葵花籽，及时将饲料、饮水置于动物可及范围；严密观察动物的精神状态、饮食、排尿排便、有无肢体水肿和压伤、有无泌尿系统血性分泌物等情况：损伤后足底常并发溃疡，因此应加强足部护理；预防自残；预防肠梗阻。

3.神经功能测评  用坐骨神经传导速度测定、足底热刺激、足底机械刺激来评价坐骨神经离断后大鼠的神经功能损伤情况。

四、实验结果

坐骨神经切断后，与健侧相比，大鼠损伤侧坐骨神经传导速度减慢，波幅下降，反射潜伏期延长：伤侧足底对热刺激及机械刺激的反应均显著延迟。

五、结果分析

臀部坐骨神经损伤是周围神经损伤中最难处理和疗效最差的损伤之一。其各段损伤与局部解剖关系密切。在本章中，作者制作了单侧大鼠高位坐骨神经机械性离断损伤模型，观察到损伤后坐骨结节以下部分，如股后肌群，小腿前、外、后肌群及足部肌肉全部瘫痪，表现为肌力、肌张力显著下降，神经传导速度减慢、波幅下降、反射潜伏期延长，对热刺激及机械刺激反应均显著延迟。说明造模成功。