摘要：非人类的灵长类动物模型在生物医学研究中很有价值。 但是，食蟹猴和恒河猴的临床病理参数参考数据有限。在本研究中，我们建立了健康食蟹猴和恒河猴在盐酸氯胺酮麻醉下的血液学和生化参考区间。 选取142只食蟹猴（雄28只，雌114只）和42只恒河猴（雄22只，雌20只）进行分析，以检测20项血液学和16项生化指标的参考区间。 同时还研究了性别的影响。血液学和生化参数的参考区间是按物种（食蟹猴和恒河猴）和性别（雄性和雌性）分别建立的。在室内实验条件下，食蟹猴和恒河猴的红细胞相关参数没有性别差异。48-96个月龄的雌性食蟹猴和恒河猴的碱性磷酸酶和γ-谷氨酰转移酶均明显低于雄性。本文所建立的血液学和生化参数的参考值可为食蟹猴和恒河猴在实验条件下进行生物医学研究提供有价值的信息。

关键词：非人灵长类 血液学  血生化 食蟹猴 恒河猴

简介：非人类灵长类动物（NHPs）是生物医学研究中有效且不可或缺的动物模型，因为人类和NHPs在行为、生理和器官功能上是相似的。此外，与啮齿动物、兔子和狗等其他动物模型相比，NHPs的免疫系统在基因上与人类更为相似。例如，啮齿动物与人类在基因上相距甚远，只有64%的基因同源性，而猕猴和人类在基因上有92%的相似性。食蟹猴（Macaca fascicularis）和恒河猴（Macaca mulatta）是各种生物医学研究领域中应用最广泛的NHP模型，包括基因组分析和神经退行性疾病，以及生殖生物医学研究。由于在生物医学研究中越来越多地使用食蟹猴和恒河猴，因此有必要建立这些猴种的血液学和生化参数。参考值对于支持健康动物的选择和解释NHP模型中的实验室数据至关重要。研究表明，实验用食蟹猴和恒河猴的血液学和生物化学在起源、年龄、性别和物种方面存在差异。报道了食蟹猴和恒河猴的比较血液值。其他报告显示，毛里求斯的食蟹类的一些生化和血液分析物性别影响显著。此外，先前的研究报告显示，血液学和生化参数可能因分析前和环境条件而变化。先前的报告也调查了氯胺酮麻醉后动物血液学和血清生化值的变化。然而，尽管非人灵长类动物在生物医学研究中的重要性，只有少数研究对实验室条件下饲养的食蟹猴和恒河猴血液学和生物化学的参考区间进行了研究。因此，本研究的目的是为个体化食蟹猴和恒河猴在应用于生物医学研究之前评估个体健康状况指标提供全面、准确的血液学和生化值参考区间。

动物：研究种群由142只食蟹猴（雄28只，雌114只； 48-96 月龄）和42只恒河猴（雄22只，雌20只； 48-96 月龄）组成。根据人类对猕猴的年龄分类标准，所有实验动物都被认为是“年轻的成年人”。这些猴子被安置在不锈钢笼子里，温度被控制在23 ± 1 °C的，相对湿度为f 50 ± 5%和12:12 h的明暗循环的环境下。经兽医检查所有的猴都是健康的。

采血和制备：禁食（14-16 h）后，肌肉注射氯胺酮（5 mg/kg）对动物进行深度麻醉，并用23号针从股静脉抽取4ml血样。然后，将所有血样中的1 ml等分试样分别转移到EDTA-K2试管中，进行血液学分析，将剩余的3 ml等分试样转移到肝素试管中，以1600µg离心分离血浆， 15 min用于生化分析。所有样本均在抽血后2小时内处理。

血液学和生化分析：在进行血液学检测之前，将每个样本在试管滚筒混合器上轻轻均匀化15 min。使用HEMAVET 950FS血液学分析仪对全血进行血液学测量，使用Dri-Chem 7000i生化分析仪进行生化分析。

结果：食蟹猴和恒河猴血液学和生化参数的参考范围：血液学和生化参数的参考范围见表2、3、4和5。表2和表3分别列出了食蟹猴和恒河猴红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度（RDW）、白细胞（WBC）计数的参考值，中性粒细胞（Neut）计数、淋巴细胞（lymphon）计数、单核细胞（Mono）计数、嗜酸性粒细胞（Eosin）计数、嗜碱性粒细胞（Baso）计数、白细胞差异计数百分比、血小板（PLT）计数和平均血小板体积（MPV）。表4和表5概括了天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、血尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TCHO）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、甘油三酯（TG）、总胆红素（TBIL）、无机磷酸盐（IP）、钙（Ca）水平的结果，食蟹猴和恒河猴的γ-谷氨酰转移酶（GGT）、乳酸脱氢酶（LDH）和直接胆红素（DBIL）。

性别对食蟹猴和恒河猴血液学指标的影响：血液学分析结果见表2和表3。食蟹猴（表2）和恒河猴（表3）的红细胞计数均未发现显著变化。雄食蟹猴的HCT和MCV值显著高于雌食蟹猴。在恒河猴中，雄性的MCV值显著低于雌性。与雄性猕猴相比，雌性猕猴的白细胞计数有增加的趋势，尽管没有显著差异。此外，食蟹猴和恒河猴的PLT参数均未见明显变化。

性别对食蟹猴和恒河猴生化指标的影响：生化参数分析结果见表4和表5。无论是食蟹猴还是恒河猴，雄性的ALP和GGT值都显著高于雌性。食蟹猴的BUN和CRE存在显著的性别相关差异。此外，发现雄性食蟹猴体内的IP和LDH明显高于雌性食蟹猴。此外， 48~96月龄之间的食蟹猴的TCHO和DBIL也显示出显著的性别效应。恒河猴性别对TP和TBIL的影响具有统计学意义。

结论：在实验条件下，我们重点分析了两种NHP（食蟹猴和恒河猴）的血液学和生物学参数的基线值。由于预分析条件和分析条件明显不同，因此很难将本研究中的观测值与文献中的观测值进行比较。然而，本研究中建立的血液学和生物学参数的参考范围可能代表了生活在应激条件下的年轻成年食蟹猴和恒河猴，因此可以作为选择健康动物和评估临床前研究的基础。需要进一步的综合研究来探讨年龄和性别对其他年龄组动物的生理参数的影响，包括婴儿到青少年（0-5岁）、中年人（10-20岁）和老年人（20岁以上）。

原文出自：https://link.springer.com/article/10.1186/s42826-019-0006-0