(1)复制方法 肺炎支原体国际标准菌株FH(ATCC15531)接种于支原体液体培养基(主要成分为牛脑心浸液基础培养基、无菌胎牛血清、新鲜酵母浸液、葡萄糖、青霉素和酚红等,调整pH为7.6左右)。利用10倍稀释法将待测菌液以培养基稀释成1×10的-1次方~1×10的-12次方一系列浓度,经37℃恒温培养7d后,以培养基由红色变为黄色时的最高稀释度作为颜色改变单位(color change unit, CCU),则菌液浓度以CCU/ml计。体重为180~200g的实验大鼠,经1周饲养观察后,在标准条件下分笼饲养。将1000000CCU/ml的肺炎支原体培养液缓慢地滴入鼻孔内,利用其自然吸气式动作,将菌液吸入气道至肺部,1次/d,每次0.2ml。接种后每日观察其活动、进食等情况。
(2)模型特点 模型大鼠在感染肺炎支原体3d后,可出现精神沉郁,活动减少,被毛粗糙,体温升高,肺部出现明显的湿性啰音。第10日时临床症状加重,尤其是鼻部出现脓性分泌物,个别动物并带有少量血丝,呼吸时可听到鼻塞声和喘鸣声。在感染后10d内可有部分动物死亡。模型动物感染10d后肉眼可见肺部病变明显,全肺充血和出血,严重者肺叶分布散在大小不等的坏死灶病理组织切片镜下观察,可见支气管及血管周围有明显的淋巴细胞浸润,形成套管现象和间质性支气管肺炎。
(3)比较医学 本方法复制的肺炎支原体模型大鼠模型,在模型动物鼻内接种1000000CCU/ml的肺炎支原体国际标准菌株后,多数模型大鼠在感染肺炎支原体3d后出现与肺炎有关的活动减少,体温升高,肺部出现湿性啰音等临床表现,随造模时间延长各种肺炎症状可加重,并可发生模型动物死亡。表明肺炎支原体感染大鼠肺炎较小鼠肺炎支原体模型易感。所以本模型也可用于人类肺炎支原体感染的发病机制、疗效观察及新药筛选方面的研究。