1.造模材料 动物:Wistar大鼠,雌性,体重(180±10)g;药物:戊巴比妥,青霉素;器械:体定位仪,电子刺激器。
2.造模方法 造模大鼠腹腔注射戊巴比妥40mg/kg麻醉后固定于江湾Ⅰ型脑立体定位仪上,按照Ktinig图谱确定大鼠左右杏仁核,坐标为前囟后30mm,旁开48mm,硬脑膜下88mm,插入两根直径为0.25mm的绝缘双极电极,尖端分开约0.25mm,另一端分别焊接一微型插头;电极和微型插头用牙托粉固定在颅骨表面。术后连续3天腹腔注射青霉素10万u,预防感染。
术后两周,每天一次恒流刺激右侧杏仁核,参数为400μA单相方波,波宽1ms,频率60Hz,持续时间1s。记录脑电变化及放电潜伏期(latency)、后放电时程(after dis-charge duration, ADD)和发作强度(seizure severity)。放电潜伏期为刺激结束到刺激核团出现高幅棘波放电的时间;后放电时程是指刺激后杏仁核EEG波幅至少为刺激前的两倍和频率在1Hz以上的放电持续的时间;发作强度根据Racine法进行行为分期:Ⅰ.不动、闭眼、胡须动、嗅;Ⅱ.点头、咀嚼伴有面部抽搐;Ⅲ.一侧前肢抬起,阵挛;Ⅳ.站立并伴有两侧前肢的阵挛;Ⅴ.站立、跌倒,伴有全身性阵挛发作。连续5次出现第Ⅴ期反应即为完全点燃。
3.造模原理 电刺激杏仁核引起动物癫痫。
4.造模后的变化 刺激后左右杏仁核均出现高幅高频的痫性放电,随刺激次数增加,后放电时程进行性延长,由开始刺激时的(10±2.1)s到首次出现第Ⅴ期反应时的(45.3±5.4)s;至完全点燃需刺激次数为(13.3±4.2)次。
5.注意事项 手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。
术后大鼠应分开,等苏醒后3~5h才能合笼饲养,防止先醒的舔咬昏迷大鼠的伤口。饲养室内尽可能保持大鼠最适温度、湿度。