目的 观察miR-424-5P对结肠癌细胞增殖的影响,探讨Src-YAP信号通路在其中的作用。
方法 以结肠癌HT-29细胞作为研究对象,转染法外源性上调miR-424-5P水平,设置空白组(Blank 组)、空载体组(NC组)和过表达组(miR-424-5P-OV组);RTFQ-PCR检测miR-424-5P水平;MTT法检测细胞活力;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;免疫荧光法检测YAP核质分布情况;Western blot法检测Src、YAP、LATS1及各自磷酸化表达水平。
结果 相较于NC组,miR-424-5P-OV组miR-424-5P RNA水平明显上调(P<0.01)。 miR-424-5P过表达明显降低HT-29细胞活力和克隆形成能力(P<0.01)。 Blank组和NC组细胞YAP以核表达为主,细胞质分布较少, 而miR-424-5P-OV组细胞 YAP可见明显的细胞质和细胞核分布。 miR-424-5P过表达可显著上调p-YAP和p- LATS1蛋白表达水平(P<0.01),下调p-Src蛋白表达水平(P<0.01)。
结论 miR-424-5P过表达可抑制结肠癌HT-29细胞增殖,该作用可能与Src-YAP通路信号减弱有关。
阅读原文:miR-424-5P对结肠癌细胞增殖的影响及机制探讨.pdf