目的 研究冈田酸(okadaic acid, OA)对斑马鱼幼鱼神经行为功能的影响,初步探索斑马鱼模型在神经退行性疾病研究中的应用前景。
方法 用0.05、0.10和0.20μmol/L的OA溶液处理受精后3d(3 dpf)的斑马鱼幼鱼7d,记录幼鱼死亡数,并利用行为学分析系统采集幼鱼30 min内的游动轨迹,测量每组幼鱼的游动距离和呆滞时间。采用实时荧光定量PCR法检测各处理组幼鱼体内蛋白磷酸酶2A(PP2A)和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)的表达情况。
结果 与对照组比较,0.05μmol/L 和0.10 μmol/L OA组处理7d后的幼鱼存活率无显著差异(P值均>0.05),游动轨迹也无明显改变。与对照组比较,0.20 μmol/L OA组幼鱼存活率明显降低,游动活力明显下降,游动距离明显缩短,呆滞时间明显延长(P值均<0.05);而且幼鱼体内PP2A基因表达水平明显下调(P<0.05),α7-nAChR基因表达水平则无明显改变(P>0.05)。
结论 0.20 μmol/L的OA处理7d导致斑马鱼幼鱼的神经行为功能异常。