杂合子还是纯合子?细胞模型该如何选择

来源:赛业生物 发布时间:2021年05月10日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

   

 

科研一直以来都是烧钱的活动,我想很多同学对此肯定深有体会。

 

以前我们老板买试剂

 

我买试剂

 

作为科研萌新,有时不仅得说服老板购买外包服务,同时还得与公司代理协商,真的是太难了。

 

比如说,我们要购买一个基因敲除细胞模型,公司提供了价格较低的杂合子与价格较高的纯合子,我们该如何选择?

 

纯合子与杂合子的区别

本着务实求真的科研精神,我们是不是需要先了解下纯合子与杂合子的区别?

图片来源:https://biologydictionary.net/homozygous/

 

在人和小鼠等二倍体生物的细胞中存在两个染色体组,在两个同源染色体相同位置出现的基因我们称之为等位基因。当这两个等位基因完全相同时,我们就说这个细胞是纯合子,而当两个等位基因不同时,这个细胞就是杂合子。也就是说,同一个细胞,在某对等位基因上是纯合子,在另一对等位基因上也可以是杂合子。

 

具体到基因敲除的模型构建上来说,单个基因的敲除,涉及到一对等位基因的敲除,和单个等位基因的敲除。自然而然的,敲除一对等位基因就比敲除单个等位基因的效率要低,因此工作量也就大很多,也就造成很多公司报价上的差异。

 

作为生命科学未来的“包工头”,以后分分钟要管理上千万的项目资金,我们肯定得科学地省钱,破除封建迷信,当然土豪随意。

 

纯合子、杂合子该如何选择

在利用功能缺失策略对基因进行研究时,也就是基因敲除啦,一般情况下我们都是需要纯合子敲除细胞系的(除非纯合致死)。这时候,我们要记住一点,在设计实验的过程中需要结合我们的实验目的和下游检测手段,最终设计出合理的上游实验。也就说,对于基因敲除的下游验证,一般是Western Blot和免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。在Western Blot的验证中,野生型和杂合子相比,理论上目的基因的表达量只是减少一半,甚至有些时候因为遗传补偿效应目的基因的表达量减少不了一半。毫无夸张地说,杂合子的敲除细胞系还不如做个敲低稳定细胞系来得靠谱。因此,对于敲除细胞系,还是花点精力或费点经费整纯合子会靠谱点。

 

而在某些情况下,我们并不要求纯合子,杂合子细胞模型就能出色解决问题了。比如,我们一位同学想要研究目的蛋白在胚胎干细胞分化过程中的动态,这时就涉及到了蛋白体内动态模型的模拟和构建。由于是个动态过程,细胞需要进行分化,而且目的蛋白的调控方式不能被改变,因此只能通过KI(knock in)的方法在目的基因的终止密码子前插入荧光蛋白标签,而后续涉及到的是活细胞成像技术。在这种情况下,目的蛋白不需要做到蛋白定量,因此也就不需要要求纯合子。

 

就是酱紫,可以说无论是站在科研投入还是实验可行性的层面,实验思路和实验设计将是决定研究是否能顺利进行的关键部分。在当前各种实验均可外包的科研环境下,小编认为科研人员更应该在实验思路和课题方向预测的层面下功夫。同时,赛业生物为了更好地助力科研,我们拥有专业的技术支持团队和研发团队,从实验思路的探讨到实验服务的定制交付,我们均能提供专业的技术支持和服务支持。如有需要,欢迎联系我们咨询。

 

聚焦体内体外研究,KO细胞株+KO/cKO小鼠组合订购,低至2.48万!

当我们研究某个基因的调控功能时,如果能同时从动物模型及细胞动物得到验证,便可更加充分地证实其调控作用,提高实验设计的严谨性,特别对于高分文章的发表,更为重要,此外同时构建细胞模型和动物模型可节省时间,发文更快速。

 

赛业生物长期致力于基因编辑细胞和动物模型的建立,拥有经验丰富的专家团队和成熟稳定的技术平台,可为客户提供目的基因的表达调控的细胞模型和动物模型,以及相关的表型检测、功能验证、病理分析等一系列的服务。在细胞生物学领域有实力的,缺少赛业在模式动物领域的积累。在模式动物领域有实力的,缺少赛业细胞生物学平台的沉淀。赛业生物一站式服务平台联合推出细胞模型、动物模型基因编辑服务打包活动,基因敲除细胞株、基因敲除小鼠、条件性敲除小鼠任意搭配,低至2.48万!从体外细胞实验到体内动物实验,选赛业,不纠结!点击图片了解活动详情!

 

Smart-CRISPR细胞基因编辑技术,快至8周,低至1.66万!

赛业生物专注于细胞领域15年,基于人工智能的AlphaKnockout基因编辑专家系统和CRISPR/Cas9技术,全新升级了细胞基因编辑系统Smart-CRISPR™,该技术比普通CRISPR/Cas9技术的基因切割效率更高,可轻松实现细胞移码突变、片段敲除、多基因敲除等多种敲除策略,更好地解决蛋白阳性残留等问题,基因编辑效率显著提升,助力您发文更快速!


Baidu
map