小鼠乙型肝炎动物模型制备方法

来源:《常见和新发传染病动物模型》 发布时间:2021年05月21日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

造模方法:6~8周龄雌性BALB/c小鼠,体重14~18g。按时间点分组,每组至少3只,采用高压水注射方法,加入总体积为每克体重0.1ml的复方氯化钠溶液,5~7s内通过尾静脉注入小鼠体内,每只动物给予15μg pHBV1.3质粒。注射后第1,2,3,4,7,10,15,20天眼眶采血,分离血清以备血清学检测。注射后第1,4,7,10,15,20天处死小鼠取肝,部分肝组织用4%中性甲醛固定以备免疫组化检测,其余肝组织液氮冻存备用。应用real-time PCR、ELISA、放射免疫分析、Southern blotting、Northern blotting,以及免疫组化等方法,检测小鼠病毒血症、血清和肝组织中HBV抗原表达动态变化、肝组织中 HBV转录和复制情况以及小鼠免疫应答状况。

结果:1.3copy的HBV基因组可以在小鼠体内表达和复制,并诱导小鼠产生特异性免疫应答,其应答模式及HBV清除过程与人类的HBV急性感染类似。这种模型可以用于 HBV病毒学、免疫学以及抗病毒药物筛选等方面的研究。


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