目的 对 Bmal1基因敲除小鼠进行繁育及基因型进行鉴定,为生物节律研究提供理想的动物模型。
方法 将引进的Bmal1基因敲除小鼠,以1雄 2 雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组 DNA,PCR扩增目的基因片段,琼脂凝胶电泳进行基因结果判定,Western Blot 检测心肌组织中Bmal1蛋白表达进行结果验证。
结果 Bmal1-/-小鼠与Bmal1+/+小鼠相比,表型除体重外未见明显差异,纯合敲除小鼠丧失繁殖能力;Bmal1-/-小鼠24 h血糖节律改变,Bmal1 基因敲除小鼠繁育成功,获得一批基因敲除鼠。
结论 应用 PCR 法可成功鉴定 Bmall 基因敲除纯合小鼠,PCR扩增法是检测小鼠基因的有效方法。
阅读原文:Bmal1时钟基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定.pdf