目的 探索洛铂在结肠癌细胞中的抗肿瘤活性,阐明潜在分子机制,为临床应用提供理论证据。 

方法 体外培养结肠癌细胞 SW480,用 MTT 比色法和克隆形成实验检测不同浓度的洛铂分别处理结肠癌 SW480 细 胞株 24、48 h 和 72 h 后,对结肠癌细胞增殖活性的抑制作用;用流式细胞仪检测不同浓度梯度的洛铂对结肠癌 SW480 细胞株凋亡率的影响;采用 Western blot 检测洛铂对 SW480 细胞凋亡相关蛋白 CASPASE-3、BAD、BCL-2 的 表达;添加 AKT 抑制剂及激动剂,采用 Western blot 检测 CASPASE3、AKT、pAKT、BAD、p-BAD 和 BCL-2 表达量,探讨洛铂促结肠癌细胞凋亡的作用机制。 

结果 洛铂能显著抑制体外培养的 SW480 细胞的生长,呈现为时间剂量依 赖型;洛铂可诱导结肠癌 SW480 细胞凋亡,且随着洛铂浓度的增加,结肠癌 SW480 细胞凋亡率显著提高,结果具有 统计学意义。 洛铂可下调结肠癌细胞抑凋亡基因 BCL-2 蛋白表达,上调促凋亡基因 BAD 和 CASPASE-3 蛋白表达 量;添加 AKT 抑制剂 MK-2206 后,pAKT、p-BAD 和 BCL-2 蛋白表达显著降低,CASPASE3 蛋白表达显著升高,促进 了细胞凋亡,结果具有统计学差异。 添加 AKT 激动剂 SC97 处理后,pAKT、p-BAD 和 BCL-2 蛋白表达显著上调, CASPASE3 蛋白表达显著下调,抑制了细胞凋亡,结果具有统计学意义。 

结论 洛铂能显著抑制人结肠癌 SW480 细胞增殖,诱导癌细胞凋亡,洛铂可能通过 AKT/ BCL-2/ BAD 信号通路发挥促细胞凋亡作用,是一种有效的抗结肠 癌药物。

阅读原文：洛铂对结肠癌细胞的抗肿瘤活性及机制研究.pdf