1．实验动物  雄性BABL/c小鼠(4周龄，体重12g左右)。Coxsackievirus B3(CVB3)， Hep-2细胞株和VERO细胞株。

2．实验方法  毒力的测定：将CVB3病毒用维持液作连续10倍稀释，由10的-7次方至10的-12次方，使用96孔板，每个稀释度病毒液种3个细胞孔，每孔加0.05ml病毒液+0.05ml维持液+0.05ml VERO细胞液，于37℃、5％CO2、100％湿度培养，每天观察细胞病变，待无新的细胞病变出现时，记录结果。按照Reed公式计算TCID50(半数感染剂量)。计算方法：TCID50效价=高于50％细胞病变百分b匕之病毒稀释度的倒数+距离比例。距离比例=(高于50％的死亡百分数－50)/(高于50％的死亡百分数－低于50％的死亡百分数)=(67－50)/(67－10)=0.3。查对数表算出TCID50=10的10.3次方，该病毒的TCID50=10的10.3次方/0.05ml，即病毒滴度为10的12次方TCID50/ml。结果表明，CVB3在VERO细胞液测得的该病毒液滴度为10的12次方TCID50/ml，以BABL/c小鼠注入一定量CVB3病毒液产生中等程度病毒性心肌炎作为实验剂量。取 BABL/c小鼠60只，体重12g左右，小鼠ip含1000000 TCID50 CVB3病毒0.1ml。于实验第7天、14天处死10只小鼠，无菌取心脏，修剪血管及结缔组织，称重，用10％中性甲醛固定，待做光镜检查。

3．参考结果  一般观察，感染病毒的小鼠在第三天出现病毒性心肌炎的疾病症状，表现为体重增长减慢，毛蓬松，震颤，体温降低，有些小鼠后肢无力，瘫痪。解剖时，感染病毒的小鼠心脏表面肉眼可见明显的白色斑点或斑块。BALB/c小鼠接种CVB3后第1天就可在心肌组织中测到病毒的存在，第3天病毒含量达高峰，然后心肌组织中病毒滴度逐渐下降，第9天病毒在心肌组织中仍保持较高的滴度。心肌出现不同程度的变性坏死，心肌间隙增宽，血管扩张充血，炎性细胞呈灶性或散在分布(以淋巴细胞和单核细胞为主)，心外膜处尤为明显，并可见组织细胞增生。