迄今为止，尚未见到有关小型猪组织中各种酶的酶组织化学系统的研究和报道材料。作者对小型猪各组织中的酶进行了初步的酶组织化学研究，旨在探讨小型猪组织中酶的构成与人类的差异，并从酶组织化学的角度来探讨小型猪是否能作为一种新型的实验动物而在医药教学科研中应用。本文着重进行小型猪小肠的酶组织化学研究。

小肠是机体进行消化和呼吸的主要部位，小肠的环形皱襞和绒毛以及吸收细胞游离面的微绒毛，总计可使小肠的表面积扩大约600倍；小肠分泌大量肠液，对食物进行充分的化学性消化；食物经各种消化酶和胆汁等的消化分解后，蛋白质分解为氨基酸；碳水化合物分解为单糖，脂肪分解为甘油、脂肪酸和甘油一酯。因此，如小型猪的小肠酶组织化学结果与人类的相似，就可以小型猪为实验室模型研究人的消化吸收机理及某些消化系统疾病的发生机理，从而有助于预防和治疗某些消化系统疾病。

1.材料及方法  本实验所用小型猪取自贵阳中医学院。取雌性小型猪3只，雄性3只，分别股动脉放血处死后，立即取小肠于液氮中骤冷，然后恒冷(－15℃左右)切片，作20种酶的组织化学染色，所染的酶和所用方法见表2-7所示。             

2.结果  酶组织化学染色切片观察可见，不同酶在小肠黏膜上皮内分布不同。8种脱氢酶和2种氧化酶主要定位于上皮细胞的顶部及底部；ALP、ATPase、5'-N主要定位于纹状缘；ANAE、NAE、 ACP和TPP主要定位于上皮细胞的胞质内，分布较弥散，但细胞核上部分活性较强。

为比较各实验组酶活性改变，按着色深浅将酶活性分为6级：阴性反应(－)，弱阴性反应(±)，阳性反应(＋)，较强阳性反应(＋＋)，强阳性反应(＋＋＋)和极强阳性反应(＋＋＋＋)。酶组织化学染色结果如表2-8所示。

3.讨论  从以上结果可显示：

(1)己糖激酶(HGK)  其功能是使葡萄糖磷酸化形成6-磷酸葡萄糖，是葡萄糖进入糖酵解途径的第一步，也是酵解过程的第一个限速步骤。而磷酸己糖变位酶(GPM)的功能是使6-磷酸葡萄糖转为6-磷酸果糖，是葡萄糖进入糖酵解途径的第2步。乳酸脱氢酶(LDH)是糖酵解途径的最后一个酶，催化乳酸与丙酮酸之间的一个互变反应，糖酵解至丙酮酸时，在缺氧条件下，则由丙酮酸变为乳酸；在有氧条件下，则由乳酸变为丙酮酸，从而进入三羧酸循环。因此，LDH是反映糖酵解的敏感指示。HGK与GPM的活性高，说明小型猪体内糖酵解途径很活跃，而LDH活性不高，则说明小型猪体内糖代谢的主要途径为有氧氧化。人体内LDH活性较高，说明人小肠的糖类代谢是有氧氧化与无氧酵解并存的。

(2)苹果酸脱氢酶(MDH)  参与三羧酸循环，催化L-苹果酸转变为草酰乙酸的反应；琥珀酸脱氢酶(SDH)也参与三羧酸循环，其功能是催化琥珀酸转变为延胡索酸；细胞色素氧化酶(CCO)是呼吸链的终端，辅酶I黄递酶(NADH)也参与呼吸链，构成线粒体电子传递链的一个环节。以上4种酶活性均较高，说明小型猪小肠中能量的产生和转运都非常活跃。

(3)谷氨酸脱氢酶(GDH)  主要作用有两方面：一是细胞内氨浓度的调节；二是氨基酸和糖代谢(三羧酸循环)的联结点。一方面，谷氨酸经GDH作用后，生成α-酮戊二酸，进入三羧酸循环，然后被彻底氧化；也可经糖代谢过程的逆反应转变为糖；另一方面，糖代谢时可分解产生α-酮戊二酸，又可经GDH的作用合成谷氨酸，由于GDH与糖异生有关，因此常作为其观察指标之一。该酶活性较高，说明小型猪体内糖异生功能较活跃。

(4)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)  有极为重要的生理功能，是糖代谢中磷酸戊糖途径的第一个酶，体内的核糖并不依赖从食物中摄入，可以从葡萄糖通过磷酸戊糖生成。此途径的另一个重要生理功能是提供NADPH。此酶的活性较高，说明小型猪小肠内糖类代谢时的磷酸戊糖途径也较为活跃。

(5)辅酶Ⅱ黄递酶(NADPH)  NADPH的氢是体内许多合成代谢的氢原子的来源，体内常发生一些与生物合成或生物转化的羟化反应，而这些反应均需要NADPH和O2。NADPH参与了羟化链的电子传递系统。NADPH的另一个作用是维持谷胱甘肽的还原状态。此酶的活性较高，说明小型猪体内与生物合成生物转化的羟化反应较为活跃。

(6)碱性磷酸酶(ALP)  与磷酸盐(或酯)的跨膜转运有关；5'-核苷酸酶(5'-N)：可能参与核酸的降解核苷酸的跨膜转运；腺苷三磷酸酶(ATPase)：在Na+和K+的跨膜转运中有重要作用。这几种酶的活性较高，正与小肠的吸收及转运功能一致。

(7)其余的酶的活性与人类同种酶的活性相比也基本一致。

总之，本实验采用正常小型猪的小肠做酶组织化学染色后观察，发现与能量的产生和转运有关的酶活性较强，且小型猪小肠的酶谱与人类小肠酶谱相比较，可发现二者非常相似。因此，用小型猪的小肠来作实验动物模型，是完全可行的。