目的 探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。
方法 体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤 I 组、II 组和 III 组。 噻唑蓝法检测各组 SKOV3 细胞和人卵巢上皮细胞增殖变化情况;划痕实验和侵袭( transwell) 实验检测各组 SKOV3 细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹分析法检测各组 SKOV3 细胞上皮型钙粘蛋白( E- cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Ras 同源基因家族成员 A(RhoA)、Ras 相关的 C3 肉毒素底物 1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白 42(Cdc42)蛋白表达情况;实时荧光定量 PCR( qRT-PCR)法检测各组 SKOV3 细胞 RhoA、Rac1 和 Cdc42 mRNA 表达变化。
结果 各组人卵巢上皮细胞存活率差异无统计学意义(P> 0. 05)。 与空白对照组相比,舒尼替尼组 SKOV3 细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin 蛋白、 RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA 和蛋白表达显著降低(P<0. 05),E-cadherin 蛋白表达显著升高(P<0. 05)。 四君子汤 I、 II、III 组 SKOV3 细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin 蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA 和蛋白表达依次降低(P<0. 05),E-cadherin 蛋白表达依次升高(P<0. 05),呈剂量依赖性。 四君子汤 III 组上述指标和舒尼替尼组比较差异无统计学意义(P>0. 05)。
结论 四君子汤含药血清能够抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质化,可能与 RhoA/ Rac1 / Cdc42 信号通路激活受阻相关。
阅读原文:可善挺通过抑制C5aC5aR1通路对银屑病小鼠皮肤炎症和自噬的调控作用.pdf