目的 构建一种可高效支持人胚胎干细胞生长的人源饲养层细胞系。
方法 首先通过在TW2R细胞系稳定表达人E-钙黏素(E-cadherin)基因构建永生化人源饲养层细胞系 TWE3R,并比较人胚胎干细胞在 TWE3R 及其亲本细胞上的克隆形成数。 将 H9 人胚胎干细胞在 TWE3R 细胞上经过 10 代连续传代培养后,进行人胚胎干细胞特异性标志物分析、拟胚体形成分析和畸胎瘤形成检测等实验。
结果 本研究成功构建了永生化的人源饲养层细胞系 TWE3R,TWE3R 细胞可比其亲本细胞更高效地支持人胚胎干细胞生长,并且 TWE3R 饲养层细胞还具有支持低密度接种条件下(每平方厘米 5 个)人胚胎干细胞生长的特性。 此外,H9 人胚胎干细胞在 TWE3R 细胞上长期传代培养后,仍可保持所有人胚胎干细胞的未分化特性、正常细胞核型以及在体内外均可分化形成所有 3 个胚层衍生物的潜能。
结论 本研究所建立的永生化人源饲养层细胞系TWE3R具有高效支持胚胎干细胞生长的特性。
阅读原文:稳定表达E-cadherin的TW2R细胞增强人胚胎细胞生长.pdf