《小鼠铲屎官养成记》,每周为大家介绍一个小鼠繁育与健康的知识点,带大家成为一个合格的小鼠铲屎官。在进行实验研究的时候,小鼠的健康可能会影响到实验研究结果的准确性与可重复性!今天我们就来聊一聊如何进行实验小鼠健康监测。 健康监测是非常重要的,因为它可以保证动物的健康,保护实验人员的安全,而且可以为科研助力,保障实验结果的可重复性和准确性。我们发现实验大小鼠的病原体大多会造成亚临床感染,有些病原体能够在免疫缺陷小鼠上出现临床症状,但是有些病原体,即使在免疫缺陷小鼠上都没有明显临床症状......因此我们必须建立健康监测体系,来保障我们实验小鼠的健康。 健康监测的总思路 1●供应商管理 ☑ 供应商管理是重中之重; ☑ 这里的供应商不仅仅是动物的供应商,也包括饲料、垫料等其他物品的供应商; ☑ 如果有条件的话,你最好要对供应商进行现场的资质审查,去了解他们实际的生产能力、生产环境、他们出容易出问题的点等等; ☑ 对供应商的能力进行充分评估非常重要。 2●隔离检疫 在收到动物之后一定要进行隔离检疫,如果有条件的话可以进行采样检测。 3●日常监测 依靠我们自己的健康监测计划,对动物进行健康监测。 4●异常剖检 对异常动物进行剖检。因为异常动物,是你最容易发现问题的点。 5●生物安全 ☑ 不断完善设施生物安全体系; ☑ 其实设施生物安全是一个非常大的概念,它包括很多内容; ☑ 对于我们动物房管理人员以及兽医来讲,我们必须建立对设施生物安全的整体认知框架,然后再往里面填充细节,不断的去完善细节,然后建立一套体系,以对抗风险。 风险分析 【总原则】--知己知彼,百战不殆 ☑ 在进行风险分析的时候,我们要记住一个原则:知己知彼,百战不殆; ☑ 你要不断的去反问自己,我真的了解这件事情吗?我真的了解对方吗?……你可以一直反问下去,直到你能得到一个确切的答案“我很确定这个没问题”或者“这个我不能肯定,我需要更多信息辅助判断”; ☑ 对于不确定的问题,你可以找人请教,查阅文献,或者自己设计实验去验证,总之一定要获得确切的答案,不要让问号留在头脑里; ☑ 这个“彼”可以是任何东西,例如:设施、供应商、病原体等。 首先--要了解自己的设施 ☑ 关键点是掌握设施中的动物品种、健康状况、设施的风险点、生物安全措施、设施人员的操作能力等等; ☑ 目的就是要不断的发现和评估薄弱环节,找到最容易出问题的点,并不断加以完善。 其次--要了解供应商 ☑ 关键点是要掌握供应商的能力和水平,评估供应商可能出现的问题; ☑ 例如对动物供应商,我们要了解他们不同的设施、不同的品系、不同饲养方式的动物健康状况,以及了解动物种群既往健康状况; ☑ 例如对于饲料供应商,我们一定要去看从原料存储、生产过程、成品存储、辐照环节到运输方式整个过程; ☑ 例如对于刨花垫料供应商,我们一定要去看刨花的生产过程。目的是要针对供应商可能出现问题的点,做好预案和预防。 最后--要了解病原体 ☑ 作为兽医,我们还必须要了解病原体; ☑ 我们要掌握各种病原体的传播方式,控制关键点,疾病流行率等等; ☑ 一定要心怀警惕,会感染其他设施的病原体,也有可能感染我们的设施; ☑ 目的就是从病原体的角度,再次评估设施的生物安全措施是否完善。 总思路--防重于治 ☑ 兽医专业的朋友,都会对防重于治这4个字印象非常深刻; ☑ 作为实验动物兽医来讲,一定是要找到风险点,未雨绸缪,居安思危,通过对风险点的预防和控制,系统性的保障实验小鼠的健康。 常用的种群健康监测方式 目前常用的种群健康监测方式有4种:直接送检小鼠,直接接触哨兵鼠,脏垫料哨兵鼠以及EAD(Exhaust Air Dust IVC回风口粉尘)。 1●直接送检小鼠 优点:准确。 缺点: ☑ 检测范围小,仅代表被检测小鼠的健康结果; ☑ 价格昂贵,还会损失小鼠,特别是对于一些转基因或珍贵品系小鼠,本身数量就少; ☑ 我们一般会认为从一批小鼠里面直接抽取一只小鼠去送检,能代表这批小鼠整体的动物质量。其实不是这样的。有些病原体在一个种群中的感染是有比例的。它不会完全感染所有的动物。 建议: ☑ 如果要直接送检小鼠的话,送检的数量和比例就非常重要; ☑ 要关注被监测种群的历史检测数据。 2●直接接触哨兵鼠 优点:比脏垫料法准确。 缺点:监测范围小,一只哨兵鼠只能监测它所在的这个笼盒;有打架的风险。 建议:对于一些珍贵且量少的小鼠品系,可以尝试直接接触哨兵鼠;但也可以考虑直接合并采样送检。 3●脏垫料哨兵鼠 优点: ☑ 这是IVC饲养方式种群健康监测的金标准; ☑ 适用于大种群的整体监测。 缺点: ☑ 哨兵鼠本身的健康级别可能是一种风险; ☑ 有些病原体无法通过脏垫料转移; ☑ 检测结果有滞后性。 建议: ☑ 在操作中,可以使用哨兵鼠+随机动物的方式合并采样,进行监测; ☑ 要综合考虑不同的检测方法。 4●EAD(Exhaust Air Dust IVC回风口粉尘) 优点:比脏垫料更灵敏。 缺点:有假阳性结果,不能捕获所有的病原体,可能无法完全替代脏垫料哨兵鼠法。 建议:可参考某些机构,是同时采取了脏垫料哨兵鼠法+EAD的方式,进行种群监测。