目的 观察微小 RNA-574-3p(microRNA-574-3p,miR-574-3p)对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的作用机制。
方法 采用结肠癌细胞 HCT116 作为实验对象,细胞转染 miR-574-3p mimic 和阴性对照分别作为 miR-574-3p mimic 组和阴性对照组,同时以正常 HCT116 细胞作为空白对照组。 RT-qPCR 检测细胞 miR-574-3p 表达;CCK-8 法检测细胞增殖活力;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot 法检测 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 及 P53 蛋白表达变化。
结果 与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic 组 miR-574-3p 表达明显上调(P<0. 01),且在 36~ 72 h 细胞活力明显降低(P<0. 01)。 与阴性对照组相比,miR-574-3p mimic 组细胞克隆形成率显著降低(P<0. 01),同时 S 期细胞比例显著增加(P<0. 01)。 相较于阴性对照组,miR- 574-3p mimic 组 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 蛋白表达显著下调(P<0. 01),P53 蛋白表达明显上调(P<0. 01)。 阴性对照组与空白对照组上述各指标均无明显差异。
结论 miR-574-3p 可抑制结肠癌 HCT116 细胞增殖,这可能与下调 CyclinA1、CDK2、PCNA、Cdc25A 及上调 P53 蛋白表达,最终诱导细胞S期阻滞有关。
阅读原文:microRNA-574-3p抑制结肠癌细胞增殖的机制研究.pdf