目的 探究 miR-214 对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中免疫调控的作用机制。 

方法 培养肺泡Ⅱ型细胞系 A549,分别使用结核分枝杆菌疫苗株 BCG 和结核分枝杆菌标准株 H37Rv 感染 A549 细胞。 对 A549 细胞进行分组,并进行 H37Rv 感染。 qRT-PCR 检测各组细胞中 miR-214 和 FGF9 的表达情况,Western blot 检测各组细胞中 FGF9 蛋白的表达。 ELISA 检测细胞中免疫相关因子 SP-A、SP-D、TLR2 和 TLR4,炎症因子 IL-10、TNF-α、 TNF-γ、IL-1β 和 IL-8 的含量。 Western blot 检测 PI3K/ AKT 信号通路成员 PI3K、AKT、p-AKT 的表达。 

结果 和 BCG 相比,H37Rv 感染后的 A549 细胞中 miR-214 表达升高,FGF9 表达降低。 和 NC mimic+oe-NC 组相比,miR-214 mimic+oe-NC 组细胞 SP-A、SP-D、IL-10 含量显著降低,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8 含量显著升高,PI3K、 AKT/ p-AKT 表达显著升高。 NC mimic+oe-FGF9 组 SP-A、SP-D、IL-10 含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL- 1β、IL-8 含量显著降低,PI3K、AKT/ p-AKT 表达显著升高降低。 和 miR-214 mimic+oe-NC 组相比,miR-214 mimic+ oe-FGF9 组 SP-A、SP-D、IL-10 含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8 含量显著降低,PI3K、AKT/ p- AKT 表达显著降低。 

结论 miR-214 通过抑制 FGF9 的表达,进而激活 PI3K/ AKT 信号通路,导致结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞过度免疫反应,从而导致炎症发展。 

阅读原文：miR-214调控FGF9的表达参与结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中PI3KAKT信号通路的免疫调控作用究.pdf