1.造模方法 普通狨猴4只,均为雄性,雌雄白须狨猴各1只。普通狨猴静脉注射龙甲7毒株悬液,而白须狨猴则用龙甲25毒株悬液灌胃感染。感染后每周取狨猴股静脉血1~2ml。检测丙氨酸转氮酶、谷氨酞转氨酶和乳酸脱氢酶的活性;测定血清中IgM类和总抗HAV抗体。
接种后逐日取新鲜粪便,用免疫电镜法检查HAV颗粒。持续30d后,逐渐延长粪便标本采集的时间,至实验结束前为每周采集一次。
在实验感染前和感染后,根据动物临床症状,在狨猴血清酶活性首次显著升高时以及接种后第60天和第90天,作肝组织活检。
2.结果 血清ALT、谷氨酰转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的活性均见升高,肝活组织检查见有与急性病毒肝炎相一致的组织病理变化。此外,用免疫电镜法检出狨猴粪便中HAV颗粒,狨猴接种HAV后36d,血清IgM类和总抗HAV抗体均阳转。
当血清酶活性显著升高时,肝活组织检查均出现明显的病理变化,表现为肝细胞变性和轻度坏死,在接种后60d,肝组织病变加重,感染后90d,开始出现病变好转,肝组织修复,肝病理变化以细胞增生为主,病变范围缩小。
3.模型特点 采血及肝活组织检查后恢复快,其血常规及血清生化酶测定结果与人类近似,HAV毒株胃肠道接种的造模方法模拟了人类甲肝自然感染途径,可作为研究甲肝的良好动物模型。