目的 探讨七氟醚对缺氧诱导的小胶质细胞炎症反应的影响,及对转录因子NF-E2相关因子2 (NRF2)及血红素加氧酶 1(HO-1)/高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通路的调控作用。 

方法 缺氧不同时间(0、2、4、 6、8、12 h)诱导 BV-2 小胶质细胞活化建立炎症模型,倒置显微镜观察细胞活化形态并计算活化细胞比例;Western blot 法检测小胶质细胞 NRF2、HO-1、HMGB1 及白介素 1β(IL-1β)蛋白表达水平,筛选最佳缺氧时间 8 h。 观察缺氧 8 h 条件下七氟醚不同浓度(0%、2%、4%、6%)处理 30 min 对 NRF2、HO-1、HMGB1、IL-1β 蛋白表达的影响。 将 BV -2 细胞分为正常对照组、缺氧诱导组、6%七氟醚组、SnPP 组(NRF2 / HO-1 通路抑制剂-锡原卟啉)、6%七氟醚+ SnPP 组,计算活化细胞比例并检测细胞 NRF2 / HO-1/ HMGB1 通路蛋白及核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化 NF-κB p65(p-NF-κB p65)、IL-1β 蛋白表达水平。 

结果 随着缺氧时间延长,活化细胞比例及 HMGB1、IL-1β 表达逐渐升高,NRF2、HO-1 蛋白在 8~ 12 h 时下降至最低水平(P<0. 05),实验选用 8 h 为缺氧诱导条件。 随着七氟醚浓度升高,活化细胞比例、HMGB1、IL-1β 表达逐渐减少,NRF2、HO-1 逐渐升高(P<0. 05),且呈剂量依赖性,选取 6%七氟醚为处理浓度。 与正常对照组比较,缺氧诱导组 NRF2、HO-1 表达降低,活化细胞比例、HMGB1、IL-1β、p- NF-κB p65 / NF-κB p65 表达升高(P<0. 05)。 6%七氟醚组上述指标变化与缺氧诱导组相反(P<0. 05);SnPP 组上述指标变化与缺氧诱导组一致且比缺氧诱导组严重(P<0. 05)。 6%七氟醚+SnPP 组上述指标变化与 6%七氟醚组相反(P<0. 05)。 

结论 七氟醚可通过促进NRF2/HO-1活化,抑制HMGB1表达,来减轻缺氧诱导的MG活化及炎症反应进程。

阅读原文：七氟醚调控NRF2HO-1HMGB1通路减轻缺氧诱导的小胶质细胞炎症反应.pdf