目的 探讨槲皮素预处理通过 AMPK/ mTOR 信号通路介导的自噬对肝缺血再灌注损伤的保护作用。 

方法 大鼠使用随机数字表法分为对照组、模型组、槲皮素组、氯喹(自噬抑制剂)组和槲皮素+氯喹组。 手术前 3 d,槲皮素组大鼠灌胃给予 0. 1 g / kg 槲皮素,氯喹组大鼠腹腔注射 0. 02 g / kg 氯喹,槲皮素+氯喹组灌胃给予槲皮素同时腹腔注射氯喹,对照组和模型组给予等体积溶剂,每天 1 次。 构建肝缺血再灌注大鼠模型并于再灌注 6 h 后处死大鼠。 全自动生化分析仪检测大鼠肝功能指标,包括谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸酰基转移酶 (AST);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中炎性因子含量,包括白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β);单磺尸胺染色法(MDC) 观察并计算各组大鼠肝组织细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝组织中 Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK、mTOR 蛋白磷酸化水平。 

结果  对照组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列整齐,无显著坏死现象。 与对照组相比,模型组大鼠肝组织结构紊乱,肝细胞排列疏松,出现坏死,ALT、AST 水平、白细胞介素-6( IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05)。 与模型组相比,槲皮素组大鼠肝组织上述病理损伤显著缓解,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05), 肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05);氯喹组大鼠肝组织上述病理损伤显著加重,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05)。 与槲皮素组相比,槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著加重,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著升高(P <0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05);与氯喹组相比, 槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著减轻,ALT、AST 水平、IL-6、TNF-α、IL-1β 含量以及 mTOR 蛋白磷酸化水平显著降低(P<0. 05),肝组织细胞自噬率、Beclin1 蛋白表达水平及 AMPK 蛋白磷酸化水平显著升高(P<0. 05)。 

结论 槲皮素预处理可能通过激活肝缺血再灌注损伤大鼠肝组织中 AMPK/mTOR信号通路介导的自噬,从而减少炎症反应,缓解肝损伤。

阅读原文：槲皮素预处理调节AMPKmTOR信号通路介导的自噬途径改善大鼠肝缺血再灌注损伤.pdf