目的 探究辣椒素通过上调肿瘤转移抑制因子 1(MTSS1)抑制结肠癌细胞侵袭、迁移的机制。
方法 实验 1:10、25、50、100 μmol / L 辣椒素组分别加入终浓度为 10、25、50、100 μmol / L 辣椒素,对照组不添加辣椒素,恒温箱中培养 24 h;实验 2:对照组正常培养,100 μmol / L 辣椒素组添加终浓度为 100 μmol / L 辣椒素,100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组、100 μmol / L 辣椒素+MTSS1 siRNA 组在 100 μmol / L 辣椒素组的基础上分别添加终浓度为 50 nmol / L 对照 siRNA、MTSS1 siRNA,转染 4 h 更换为终浓度 100 μmol / L 辣椒素培养液。 CCK8 检测细胞增殖情况; Transwell 检测细胞侵袭情况;划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中辣椒素受体 (TRPV1)、MTSS1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 蛋白水平。
结果 不同浓度辣椒素处理细胞发现,与对照组相比,25、50、100 μmol / L 辣椒素组细胞增殖抑制率升高,10、25、50、100 μmol / L 辣椒素组细胞中 TRPV1、MTSS1 蛋白水平升高,细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平降低(P<0. 05)。 干扰 MTSS1 并添加 100 μmol / L 辣椒素发现,与对照组相比,100 μmol / L 辣椒素组、100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组、100 μmol / L 辣椒素 +MTSS1 siRNA 组细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平降低,细胞中 MTSS1 蛋白水平升高 (P<0. 05);分别与 100 μmol / L 辣椒素组、100 μmol / L 辣椒素+对照 siRNA 组相比,100 μmol / L 辣椒素+MTSS1 siRNA 组细胞侵袭数量、迁移百分比、细胞中 MMP-2、MMP-9 蛋白水平升高,细胞中 MTSS1 蛋白水平降低( P< 0. 05)。
结论 辣椒素通过上调MTSS1表达抑制结肠癌细胞侵袭、迁移,从而起到对结肠癌的保护作用。
阅读原文:辣椒素通过上调MTSS1表达抑制结肠癌细胞侵袭、迁移的实验研究.pdf