目的 研究连翘提取物(FSE)对脂多糖(LPS)诱导炎症的抑制作用,以及 LPS 诱导的 RAW264. 7 细 胞极化模型建立。
方法 MTT 法检测 FSE 和 LPS 对 RAW264. 7 细胞的毒性作用;倒置显微镜检测不同浓度的 FSE 对 LPS 刺激后的细胞形态变化,酶标仪检测细胞上清液的一氧化氮(NO)生成量;荧光显微镜检测细胞内活性氧 (ROS)和细胞凋亡的荧光强度;Real-time PCR 法检测巨噬细胞中 iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、Arginase-1 和 CD206 mRNA 的表达水平。
结果 MTT 结果发现 FSE 在 50 μg / mL 浓度时无细胞毒性,LPS 作用 36 h 时,不同浓度 FSE 对 LPS 刺激的细胞形态变化和 NO 生成有抑制作用,同时 FSE 可以抑制 LPS 刺激后活性氧(ROS)的减少和细 胞的凋亡,Real-time PCR 结果显示,用不同浓度(100、250、500、750 ng / mL) LPS 处理细胞 24 h,或者用 500 ng / mL 浓度的 LPS 处理细胞不同时间后,RAW264. 7 细胞 M1 型标记基因(TNF-α、IL-1β、iNOS、IL-6)mRNA 的表达水平明 显升高,RAW264. 7 细胞 M2 型标记基因(IL-10、Arginase-1、CD206)mRNA 的表达水平明显降低;FSE 可降低 LPS 诱 导的 M1 型标记基因 mRNA 的表达水平,升高 M2 型标记基因 mRNA 的表达水平。
结论 FSE 可通过抑制 RAW264. 7 细胞凋亡和促进 RAW264. 7 细胞的极化来抑制 LPS 诱导的炎症反应。