甲型H1N1流感病毒小鼠肺炎-肠炎模型的建立及验证

来源:中国比较医学杂志2022年第9期 发布时间:2022年11月15日 浏览次数: 【字体: 收藏 打印文章

目的 建立稳定的 H1N1 流感病毒肺炎-肠炎小鼠模型,为胃肠型流感的病理基础及抗病毒药物研 究提供工具和手段。

方法 BALB/ c 小鼠随机分为 4 组(n = 6),10 倍半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose, 10 TCID50 )组、1 TCID50 组、0. 1 TCID50 组和对照组。 除对照组外,其他 3 组小鼠滴鼻感染不同剂量的 H1N1 流感病毒。 感染病毒后,每天测量小鼠的肛温、体重,观察小鼠皮毛及精神状态等,连续 7 d。 处死后测定小 鼠脏器指数、RT-PCR 检测肺组织中甲型流感病毒 H1N1 M 基因及小肠组织中视黄酸受体相关孤儿受体 γt ( retinoid-related orphan nuclear receptor, ROR-γt)的 mRNA 表达量。 对筛选出的最佳感染剂量进行实验验证。

结果 与对照组小鼠相比,模型组小鼠 10 TCID50 组和 1 TCID50 组体重呈显著下降趋势,肺指数明显升高(P<0. 01),胸腺 指数明显降低(P<0. 01、P<0. 05),肺部病毒载量及小肠组织中 ROR-γt 的 mRNA 表达量显著升高,出现背弓佝偻、 精神不振、呼吸急促等现象,两个组的死亡率分别为 67%和 17%。 0. 1 TCID50 组小鼠指标虽有相似趋势,但无显著 性差异。 对 1 TCID50 感染剂量进行实验验证,与对照组相比,病理切片结果显示,模型组小鼠肺及小肠组织出现严 重病理损伤,肺组织中白细胞介素 2(interleukin-2, IL-2)、白细胞介素 6(IL-6)、干扰素 γ(interferon-γ, IFN-γ)、白细 胞介素 17A(IL-17A)及小肠组织中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)和 IL-2 显著升高,但肠组织中 IL-6 和白细胞介素 33(IL-33)显著降低。

结论 1 TCID50 病毒感染为建立 小鼠肺炎-肠炎模型的最佳浓度,且经过后期多批次的建模实验,证实该模型建立方法稳定、可靠,为抗病毒研究提 供良好的病理模型。

原文内容:甲型H1N1流感病毒小鼠肺炎-肠炎模型的建立及验证.pdf

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