鞘糖脂聚糖分析
鞘糖脂在细胞膜和血清中普遍存在。它们要么以游离形式存在,要么与其他蛋白质复合存在。 聚糖头部基团决定了鞘糖脂的生物学功能。异常鞘糖脂糖基化与多种癌症密切相关,例如乳腺癌、肺癌和脑瘤。鞘糖脂聚糖也参与许多细胞过程,例如信号传导、受体功能以及细胞分化。因此,详细分析鞘糖脂聚糖头部基团的结构对疾病研究具有重要的价值。
对鞘糖脂聚糖的全面分析需要使用糖苷内酰胺酶,该酶具有广泛的底物特异性,并且支持高通量分析。鞘糖脂聚糖分析涉及以下几个步骤:
1. 从细胞膜或血清中提取和纯化鞘糖脂;
2. 用糖苷内酰胺酶释放鞘糖脂聚糖;
3. 聚糖的全甲基化;
4. 基于2AB标记的UPLC-HILIC-FLD分析;
5. 通过飞行时间质谱分析全甲基化的聚糖;
有必要的情况下,通过MS/MS对聚糖结构进行确定。
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