E.coli蛋白表达服务简介

E.coli表达系统是基因表达技术中发展最早、应用最广且最为经济实惠的经典表达系统。利用该系统表达重组蛋白具有许多优越性：细胞遗传背景清楚、目的基因表达水平高、培养周期短、纯化方便、稳定性好、抗污染能力强、易于放大和适用于多种属蛋白的表达。

百欧泰生物 E.coli蛋白表达服务提供全方位的重组蛋白生产服务，在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白以及蛋白纯化和复性等方面，拥有丰富的经验和专业技术。此外我们拥有多种 E. coli 细胞株和表达载体，为您提供优质的原核蛋白表达服务。

E.coli蛋白表达服务优势

（1）多种宿主和质粒体系；

（2）多种蛋白纯化和蛋白复性技术，保证蛋白正确折叠和高蛋白溶解性；

（3）高通量蛋白表达水平；

（4）提供从基因合成、载体构建到纯化后蛋白的一站式服务，并随时沟通服务进展；

E.coli蛋白表达服务内容

客户提供目的基因或基因序列，主要交付质粒DNA、表达菌株、纯度90%以上的重组蛋白质和表达产物检测报告。检测报告主要包括测序报告、实验条件、SDS-PAGE报告和COA等。

1.基因合成及密码子优化（可选）

基因序列通过密码子优化后，蛋白表达量可提高几倍至数十倍。

2.载体构建

包括IPTG,阿拉伯糖，热休克，冷休克诱导方式，GST，Trx，SUMO，BMP，His，HA，Flag，myc等融合标签载体的构建。提供客户正确构建的重组表达质粒。

3．表达菌株筛选

将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。SDS-PAGE电泳检测，挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。

可提供表达菌株：DH5α, Top10,  BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, Golden, Rosetta(DE3), RosettaBlue(DE3),Rosetta gami B (DE3), C41等宿主。

提供客户含重组质粒的表达菌株。

4.蛋白表达及纯化

诱导表达目标蛋白。通过亲和层析，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白；可根据需求切除标签，再纯化获得目标蛋白。提供客户纯化后的目标蛋白，可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度根据客户要求可达95%以上甚至更高。

5.包涵体复性

蛋白诱导表达与包涵体纯化，数百种缓冲条件快速筛选最佳复性缓冲，采用稀释复性，透析复性，柱层析复性等多种技术获得纯度大于90%的包涵体。

6. 蛋白大规模制备

如果想要纯化获得克级蛋白，需要使用发酵罐发酵获得上百克到公斤级的菌体，百欧泰生物提供成熟的发酵罐发酵平台进行大肠杆菌或者酵母菌的高密度发酵。

服务内容

1. 5L 小罐发酵（2.5L工作体积），周期2周

2. 50L 大罐发酵（25L 工作体积），一般可收获1Kg左右菌体，周期2周

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