豚鼠自身免疫性梅尼埃病模型

简介：

梅尼埃病（Ménières disease）是一种特发性内耳疾病，在1861年由法国医师Prosper Ménière首次提出。该病主要的病理改变为膜迷路积水，临床表现为反复发作的旋转性眩晕、波动性听力下降、耳鸣和耳闷胀感。本病多发生于30～50岁的中、青年人，儿童少见。男女发病无明显差别。双耳患病者约占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素：各种感染因素（细菌、病毒等）、损伤（包括机械性损伤或声损伤）、耳硬化症、梅毒、遗传因素、过敏、肿瘤、白血病及自身免疫病等。

豚鼠自身免疫免疫性梅尼埃病模型采用同种内耳抗原免疫豚鼠，部分动物能够对同种内耳抗原产生免疫应答，导致了单侧或双侧听力受损，并出现眼震等梅尼埃病症状。

模型制作方法：豚鼠，体重350g-400g，雌雄兼用。

（1）、抗原制备  同种内耳抗原（GPCAG)取自豚鼠新鲜期骨。处死豚鼠后立即在解剖显微镜下取出迷路组织，置放与4℃0.01mol/l PH7.2的PBS中捣碎，匀浆，2500r/min离心10min，取上清液在751紫外分光光度计测定蛋白的含量，将蛋白浓度调到1200ug/ml。制成后立即免疫动物或加1/10000NaN3低温保存。

（2）豚鼠免疫方法  以同种内抗原400ug/0.05ml+CFA0.5ML，于豚鼠后足及背部皮下注射，第14天重复注射1次；第28天GPCAG 400ug/0.5ml+CFA0.5ml，于豚鼠背部多点皮下注射，第42天重复第28天注射1次。免疫后第9周检测动物模型是否成功。

观测指标与分析：

    （1）、白细胞移动抑制试验；（2）、血清抗特异性内耳抗体；（3)循环免疫复合物；（4）、耳蜗电图测试耳蜗微音电位和AP；（5）内耳石蜡切片；（6）、内耳酶免疫组化学。如实验动物出现符合四个条件，即判断为动物模型成功。

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